Diluir Biblioteca A 1 Nm Para La Concentración De Carga - Illumina iSeq 100 Manual De Uso

Guía del sistema de secuenciación iSeq 100
5 Si usa el RSB como diluyente, prepare el volumen aplicable de biblioteca a 1 nM en un microtubo de baja
adherencia:
Tipo de biblioteca
100 % de PhiX (para un experimento solo
de PhiX)
AmpliSeq Library PLUS for Illumina
Nextera DNA Flex
Nextera Flex for Enrichment
TruSeq DNA Nano
TruSeq DNA PCR-Free
La dilución de bibliotecas en microtubos de baja adherencia es fundamental para una secuenciación
correcta.
6 Agite en vórtice brevemente y, a continuación, centrifugue a 280 × g durante un minuto.
7 [Opcional] Almacene una biblioteca a 1 nM a unas temperaturas entre –25 °C y –15 °C durante un
periodo de un mes como máximo.
Diluir biblioteca a 1 nM para la concentración de carga
1 Combine los volúmenes siguientes en un microtubo de baja adherencia para preparar 100 µl de
biblioteca diluida con la concentración de carga correspondiente:
Tipo de biblioteca*
100 % de PhiX
AmpliSeq Library PLUS for
Illumina
Nextera DNA Flex
Nextera Flex for Enrichment
TruSeq DNA Nano
TruSeq DNA PCR-Free
* En el caso de tipos de biblioteca que no se encuentren en la lista, incluidas otras bibliotecas de Nextera, comience con una concentración de
carga de 50 pM y optimícela en experimentos posteriores.
En esta tabla se proporcionan ejemplos de concentraciones de carga. El sistema iSeq 100 es compatible
con todos los kits de preparación de bibliotecas de Illumina excepto SureCell WTA 3' , pero la
concentración de carga óptima puede variar.
2 Agite en vórtice brevemente y, a continuación, centrifugue a 280 × g durante un minuto.
3 Reserve la biblioteca diluida en hielo para la secuenciación.
Secuencie las librerías diluidas a la concentración de carga el mismo día en que se diluyen.
4 Si no va a añadir PhiX o si el experimento es solo de PhiX, omita la siguiente sección y pase a
consumibles en el cartucho en la página
N.º de documento 1000000036024 v05 ESP
Para uso exclusivo en investigación.
Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
Volumen de biblioteca a 1 nM que
preparar (µl)
8
7
25
12
12
12
Concentración de Volumen de biblioteca a
carga (pM)
60
50
200
100
100
100
24.
Volumen
1 nM (µl) de RSB (µl)
6
5
20
10
10
10
94
95
80
90
90
90
Cargar
23