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El tiempo de contacto de la oxidación es:
•
•
Taponado
En este paso, los grupos 5'-hidroxilo del oligonucleótido que no hayan reaccionado se
terminan. De este modo, en los pasos siguientes del acoplamiento se garantiza la incor-
poración de un nucleótido únicamente a las cadenas completas, lo que contribuye a
obtener un producto homogéneo.
El taponado implica la acilación con anhídrido acético en una mezcla de N-metilimidazol,
colidina y acetonitrilo. Pueden utilizarse otros reactivos de acilación. La preparación del
reactivo de taponado en ÄKTA oligopilot plus se realiza mezclando solución de taponado A
(N-metilimidazol al 20 % en acetonitrilo) con solución de taponado B (anhídrido acético
al 20 % y S-colidina al 30 % en acetonitrilo). El esquema de reacción se muestra en la
siguiente imagen.
Tras un lavado con acetonitrilo para eliminar el exceso de reactivo de taponado, el oli-
gonucleótido está listo para el ciclo siguiente o para el procesamiento posterior a la
síntesis.
ÄKTA oligopilot plus Instrucciones de funcionamiento 28959748 AE
1 minuto en las síntesis de ADN
2 minutos en las síntesis de ARN
C Química de síntesis de oligonucleótidos
C.5 Ciclo de síntesis
185
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