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H Bloques de método en ÄKTA oligopilot plus
Bloque de método
----- Block : Cou-
pling_Reag_Vol -----
0.00 Base Time
0.10 Coupling Time_0.5 {min}
0.30 End_block
----- Block : Coupling_push -
----
0.00 Base Volume
0.00 FlowThrough 0.50 {min}
2.00 Solvent_B ACN_Reag_4.1
12.00 LFlow_AB 0 {cm/h}
12.00 End_block
230
Descripción
Coupling indica al ordenador que debe calcular los
volúmenes correctos de amidita y activador a
agregar, de acuerdo con la escala de la síntesis y
los parámetros de ADN. Esta instrucción debe ceñir-
se a un único punto de detención, es decir, a un
solo punto temporal (0,00; 0.10; 0,30).
El caudal aplicado da un tiempo de contacto de
0,50 min la primera vez que los reactivos de acopla-
miento atraviesan la columna. El tiempo de contacto
se calcula de acuerdo con el volumen de acopla-
miento restante cuando se ha consumido un (1)
equivalente.
Nota:
Para conseguir la máxima eficiencia, el acoplamiento
total debería estar en torno a 1 CV.
Este bloque introduce la amidita y el tetrazol en la
columna y en el bucle de acoplamiento con un
caudal que creará un tiempo de contacto mínimo
de 0,5 minutos para los reactivos de acoplamiento
cuando se haya consumido 1 equivalente.
Inicialmente, el bloque utiliza acetonitrilo en la
•
bomba A y activador en la bomba B.
Tras 2 mL (1 mL por cada bomba), la válvula 4
•
cambia de ajuste para aportar acetonitrilo
también a la bomba B. El volumen de alimenta-
ción total es de 12 mL; un caudal habitual utili-
zando PrimerSupport 30, HL en la columna de
6,3 mL es de 2,3 + 2,3 mL/min. Así, la duración
de este paso es de poco más de 2½ minutos.
ÄKTA oligopilot plus Instrucciones de funcionamiento 28959748 AE
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