Cálculo E Controlo De Qualidade - Siemens Coat-A-Count TSH IRMA Manual Del Usuario

recomendada para evitar arraste de
amostra a amostra. Pipetas de
deslocamento positivo e pipetadores-
diluidores automáticos só devem ser
usados se a possibilidade de arraste
for avaliada e encontrada como sendo
insignificante.
Adicionar 100 µL de TSH Ab
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todos os tubos.
Pipetar directamente para a base
do tubo. E tenha certeza que amostra
e traçador estão bem misturados sem
a formação de espuma. A utilização
de dispensadores repetitivos, é
recomendado. Se houver tubos T
separá-los para contagem, pois eles
não necessitam mais processamento.
Agitar a temperatura ambiente (15–
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28°C), por 2 horas num agitador de
estantes, ajustado para 200
movimentos por minuto.
Decantar vigorosamente. Adicionar
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2 mL da solução de lavagem
tamponada a cada tubo, esperar de 1
a 2 minutos e decantar. Adicionar
novamente 2 mL da solução de
lavagem tamponada a cada tubo,
esperar de 1 a 2 minutos e decantar
vigorosamente.
Removendo todo o líquido
remanescente melhora-se bastante a
precisão. Após a segunda lavagem
utilizar uma estante de espuma de
decantação para decantar o conteúdo
de todos os tubos (excepto tubos T).
Deixar os tubos invertidos para
escorrer por 2 ou 3 minutos, eliminar
todas gotas residuais com papel
absorvente.
Contar 1 minuto em contador
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gamma.
Em contadores multi-canal, separar o
tubo de contagem total dos tubos
remanescentes por pelo menos um
espaço, para minimizar a
possibilidade de interferência na
contagem.
Cálculo e Controlo de
Qualidade
Para calcular resultados (em termos de
unidades de concentração) de uma
representação tipo log-log, da curva de
calibração, primeiro calcule a contagem
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correcta por minuto (CPM) para cada par
de tubos subtraindo a média de CPM dos
tubos de ligação não específica
(calibrador A).
Contagens reais = (Média CPM) minutos (Média
NSB CPM)
Então determine a capacidade de ligação
125
I a
(relativa àquela do calibrador mais alto) –
aqui chamada de % B/MB – para cada par
de tubos como uma porcentagem da
"ligação máxima", com contagem do mais
alto calibrador corrigida para NSB tomada
como 100%.
Percentagem de Ligação = (Contagens reais /
Contagens MB reais) × 100
Usando o papel gráfico log-log de quatro
ciclos, plotar a porcentagem de ligação
versus a concentração de cada par de
calibrador diferente de não-zero e
desenhar a linha aproximada que passa
por esses pontos. (Conectar os pontos
com arcos e rectas, não tente usar uma
recta para todos os pontos). As
concentrações para os controles e
desconhecidos, dentro da faixa de
calibradores não-zero, podem ser
estimadas através da interpolação da
curva. Uma plotagem de porcentagem de
ligação adicional versus concentração
para os 3 calibradores mais baixos com
representação de papel gráfico linear-
linear pode ser usado para interpolação
próxima da dose zero.
Comentários: Embora outras abordagens
sejam aceitáveis, o cálculo dos resultados
através do método descrito apresenta
certas vantagens do ponto de vista do
controle de qualidade. Produz uma curva
de calibração que é relativamente linear
tanto na representação log-log quanto
linear-linear, além de relativamente
estável entre ensaios. Produz também
parâmetros importantes de QC (Controle
de Qualidade), ou seja Porcentagem de
Ligação (%B/MB) para os calibradores
não-zero. Um gráfico ainda mais
informativo, que dá a idéia da
reprodutibilidade inter-ensaio, pode ser
obtido plotando directamente os valores
de Porcentagem de Ligação dos tubos
individuais dos calibradores, ou seja, sem
proceder inicialmente ao cálculo da média
das CPM das replicatas.
Alternativas: Embora a Porcentagem de
Ligação possa ser calculada directamente
Coat-A-Count TSH IRMA (PIIKTS-8, 2010-11-04)