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9. Análisis
Al poner en funcionamiento el aparato, es imprescindible realizar una
calibración válida de los fluorocromos (Pure Spectra Component File) y del
fondo (Background Component File). Estos archivos de calibración son
indispensables para que el software realice un cálculo exacto de los
resultados del siguiente modo:
Todas las señales de interferencia condicionadas por el aparato que influyen
en la medición, son eliminadas por el Sequence Detection Software de los
ABI PRISM Sequence Detection Systems con ayuda de los archivos
Background Component Files.
Además, en los análisis con diferentes fluorocromos se
producen
interferencias entre los espectros de emisión de cada uno de los
fluorocromos. El software de los ABI PRISM SDS compensa
estas
interferencias mediante el cálculo de los datos espectrales de cada uno de los
fluorocromos almacenados en el archivo Pure Spectra Component File. La
asignación de los datos de fluorescencia, recogidos durante todo el espectro
de medición, en el transcurso de la reacción de PCR a los fluorocromos
seleccionados, la realiza el software con ayuda de los Pure Spectra
Components. Los datos de fluorescencia de cada fluorocromo son a
continuación divididos para la señal de la referencia pasiva (ROX), para
calcular las variaciones tube to tube (diferencias en la fluorescencia entre las
diferentes muestras de PCR). Las señales normalizadas de este modo, pueden
ser analizadas con la ayuda del Amplification Plot.
Los ficheros de calibración utilizados para el análisis de una reacción de PCR
son grabados automáticamente durante el almacenamiento del transcurso de
la reacción. Si no se instala ningún fichero de calibración, cree estos
ficheros tal y como se indica en las instrucciones del manual ABI PRISM
SDS User Guide/Manual.
Si debe integrar más de un sistema artus TM PCR al mismo tiempo (tenga en
artus Parvo B19 TM PCR Kit
03/2015
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