Adición De Controles Internos; Procedimientos De Centrifugación Y Vacío - Qiagen QIAamp 61904 Instrucciones De Uso

Adición de controles internos
Para utilizar los protocolos del QIAamp DSP Viral RNA Mini junto con los sistemas de
amplificación disponibles en el mercado, se recomienda encarecidamente la introducción de
un control interno en el procedimiento de purificación para garantizar que se obtengan
resultados de análisis fiables. El ARN o ADN de control interno se debe añadir junto con el
ARN transportador al tampón de lisis. Para optimizar la eficacia de purificación, las moléculas
de control interno deben tener una longitud superior a 200 nucleótidos, ya que las moléculas
más pequeñas no se recuperan eficazmente.
Consulte las instrucciones del fabricante para determinar la concentración óptima. Si no se
utiliza la concentración recomendada, la eficacia de amplificación puede ser menor.
Procedimientos de centrifugación y vacío
El procedimiento de purificación del QIAamp DSP Viral RNA se lleva a cabo en tres pasos
utilizando las columnas de centrifugación QIAamp Mini en una microcentrifugadora
convencional, en un colector de vacío o en el instrumento QIAcube. Los procedimientos se
han diseñado para garantizar que no haya contaminación cruzada entre muestras y permitir
la manipulación segura de muestras potencialmente infecciosas.
Las columnas de centrifugación QIAamp Mini se pueden utilizar en la mayoría de tubos de
microcentrifugadora convencionales. En el caso del protocolo de centrifugación, los tubos de
lavado (WT) (suministrados) de 2 ml son necesarios para sostener la columna de
centrifugación QIAamp Mini durante los pasos de carga y lavado debido al volumen del
filtrado. En el caso del protocolo de vacío, son necesarios el colector de vacío
(QIAvac 24 Plus o uno equivalente; consulte la página 16) y una bomba que pueda producir
un vacío de entre –800 y –900 mbar (por ejemplo, QIAGEN Vacuum Pump).
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Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021 11