Qiagen QIAamp 61904 Instrucciones De Uso página 37

Para la elución en el paso 14, deje que el Buffer AVE se equilibre a temperatura ambiente.
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Asegúrese de que el Buffer AW1 y el Buffer AW2 se hayan preparado siguiendo las
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instrucciones que se indican en la página 26.
Añada ARN transportador reconstituido en Buffer AVE al Buffer AVL según las instrucciones de
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la página 24.
Para el procesamiento con el uso de los VacConnectors y VacValves, prepare el
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QIAvac 24 Plus como se describe en la página Error! Bookmark not defined..
Procedimiento
1. Pipetee 560 µl de Buffer AVL preparado que contenga ARN transportador en un tubo de
lisis (LT).
Si el volumen de la muestra es mayor a 140 µl, incremente la cantidad de Buffer AVL
y ARN transportador de manera proporcional (por ejemplo, una muestra de 280 µl
requerirá 1120 µl de Buffer AVL y ARN transportador) utilice un tubo más grande.
2. Añada 140 µl de plasma, suero, orina, sobrenadante de cultivo celular o líquidos
y secreciones corporales extracelulares a Buffer AVL y ARN transportador en el tubo de
lisis (LT). Mezcle mediante agitación vorticial de pulsos durante al menos 15 segundos.
Para garantizar la eficiencia de la lisis, es fundamental que la muestra se mezcle bien con
el Buffer AVL a fin de obtener una solución homogénea. También se pueden utilizar las
muestras congeladas que únicamente se han descongelado una vez.
3. Incube a temperatura ambiente durante 10 minutos ± 1 minuto.
La lisis de la partícula vírica se finaliza una vez que se haya realizado el lisado durante
10 minutos ± 1 minuto a temperatura ambiente.
4. Centrifugue brevemente el tubo para eliminar las gotas del interior de la tapa.
5. Añada 560 µl de etanol (96-100 %) a la muestra, mezcle mediante agitación vorticial de
pulsos durante al menos 15 segundos. Una vez finalizada la mezcla, centrifugue brevemente
el tubo para eliminar las gotas del interior de la tapa. Inserte la columna de centrifugación
QIAamp Mini en el VacConnector del colector de vacío del QIAvac 24 Plus.
Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021 37