Adsorción Sobre La Membrana Qiaamp; Eliminación De Los Contaminantes Residuales; Elución Con Buffer Ave - Qiagen QIAamp 61904 Instrucciones De Uso

Adsorción sobre la membrana QIAamp
Las condiciones de tamponado del lisado se deben ajustar para que las condiciones de unión
sean óptimas para el ARN vírico antes de cargar la muestra en la columna de centrifugación
QIAamp Mini. Debido al gran volumen del lisado, este deberá cargarse en la columna de
centrifugación QIAamp Mini siguiendo varios pasos. El ARN vírico se adsorbe en la membrana
de gel de sílice QIAamp durante dos breves pasos de centrifugación o mediante vacío. Las sales
y el pH de lisado garantizan que las proteínas y otros contaminantes que pueden inhibir las
reacciones enzimáticas anterógradas no se retengan en la membrana QIAamp.
Eliminación de los contaminantes residuales
Se eliminan los agentes contaminantes del ARN vírico que está unido a la membrana QIAamp
durante dos breves pasos de centrifugación o vacío. El uso de dos tampones de lavado
diferentes, AW1 y AW2, mejora significativamente la pureza del ARN eluido. Las
condiciones de lavado optimizadas garantizan la eliminación de todos los residuos
contaminantes sin que ello afecte a la unión del ARN.
Elución con Buffer AVE
El Buffer AVE consta de agua sin ARNasas que contiene un 0,04 % de azida sódica para
prevenir el crecimiento microbiano y la contaminación posterior con ARNasas. La azida
sódica afecta a las lecturas de la absorbancia espectrofotométrica de entre 220 y 280 nm,
pero no afecta a las aplicaciones posteriores, como la RT-PCR. Si desea determinar la pureza
del ARN eluido, le recomendamos calibrar el espectrofotómetro con Buffer AVE antes de medir
la absorbancia.
8 Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021