3.4.2 Cebado de la bomba de lavado de la aguja
La bomba de lavado de la aguja aclara la aguja del sistema de gestión de muestras para
impedir la contaminación de muestras de una inyección a otra. Este ciclo también alarga la
vida de las juntas del inyector ya que elimina la fase móvil tamponada y la muestra de la
aguja.
Selección del disolvente de lavado de la aguja
Se recomienda utilizar un disolvente de lavado de la aguja en función de la composición
química de la fase móvil y de la muestra, siempre y cuando todas las soluciones y los
tampones se puedan mezclar entre sí y sean solubles.
Un separación por gradiente normalmente implica el uso inicial de una combinación de
eluyentes débiles, mientras que en las condiciones finales generalmente es necesaria una
combinación de eluyentes más fuertes. Por lo general, se recomienda utilizar un disolvente
de lavado de la aguja de composición similar a la de los eluyentes finales. Por ejemplo, en
una separación con un gradiente de eluyente inicial de agua al 80% y de metanol al 20% y
con un gradiente final de agua al 10% y de metanol al 90%, un disolvente de lavado de la
aguja eficaz tendría una concentración de agua al 20% y de metanol al 80%.
La elección de un disolvente de lavado de la aguja similar pero no igual a la composición
del gradiente final asegura la solubilidad de los primeros compuestos que eluyen. Si la
solubilidad de la muestra en la fase móvil depende del pH, se debe elegir un disolvente de
pH similar. Si se utilizan ácidos, se recomienda evitar que el sistema de lavado de la aguja
esté expuesto durante un periodo de tiempo prolongado a ácidos de composición haloidea.
Si se utilizan muestras con un alto contenido de componentes hidrofróbicos, se
recomienda experimentar con diferentes disolventes para determinar cuál es el más
apropiado. En estos casos, la utilización de un disolvente con una composición de agua al
20% y de metanol al 80% con tetrahidrofurano (THF) o bien dimetilsulfóxido (DMSO)
[disolvente de lavado de la aguja con 1-5 mL de THF o de DMSO/99-95 mL] puede ser
más adecuada.
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Preparación del Módulo de separaciones 2695