Ausführen Des Dienstprogramm-Assays - Beckman Coulter Biomek FX-ADMETox Manual Del Usuario

Kurzübersicht
Verwendung der PAMPA EVOLUTION96 Software und Biomek FX Workstation
Ausführen des Dienstprogramm-Assays
1. Bereiten Sie den Systempuffer mit verschiedenen pH-Bedingungen vor
a. Bereiten Sie 1 l Systemlösung vor, indem Sie 25 ml Systemlösungskonzentrat in
einem Zylinder mit Mess-Skala auf insgesamt 1 l mit destilliertem Wasser auffüllen
b. Gießen Sie gleiche Aliquote Systemlösung in 3 saubere Glasflaschen (je ca. 333 ml)
c. Messen Sie den ursprünglichen pH-Wert der Systemlösung mit einem pH-Messer
d. Justieren Sie den pH-Wert auf 7,4; 6,2 und 5,0, indem Sie gemäß der
untenstehenden Tabelle 0,5M NaOH hinzufügen.
e. Überprüfen Sie den pH-Wert der Systemlösung mit dem pH-Messer.
.pHstart =2,6
pHtarget
5,0
6,2
7,4
f. Geben Sie gemäß der untenstehenden Tabelle 15 ml der pH-angepassten
Systemlösung in jede Unterteilung des 12-Kanal-Reservoirs mit hohem Profil:
1 2
pH pH
7,4 7,4
2. Bereiten Sie GIT-Lipid vor.
a. Tauen Sie 2 Glasampullen mit GIT-Lipidlösung auf.
b. Brechen Sie die Ampullen mit einem Ampullenöffner auf.
c. Leeren Sie die GIT-Lipid in die erste Säule eines 12-Kanal-Reservoirs mit niedrigem
Profil.
d. Transferieren Sie 18 µl des Lipids in jede Vertiefung der Lipid-Platte.
3. Bereiten Sie Acceptor-Systempuffer (ASB 7.4) vor.
a. Geben Sie 50 ml ASB 7.4 in ein Reservoir mit niedrigem Profil.
4. Bereiten Sie die Testmischungen vor
a. Spektroskopische DMSO-Reinheit für die Zubereitung von Testmischungen.
b. Geben Sie den Testmischungen gemäß der untenstehenden Tabelle DMSO zu:
36
.pHstart=2,8
NaOH (ml) pHtarget
5,5 5,0
8,3 6,2
11 7,4
3 4 5 6
pH pH pH pH
7,4 7,4 6,2 6,2
.
.pHstart=3,0
NaOH (ml) pHtarget
5 5,0
7,8 6,2
10,5 7,4
7 8 9
pH pH pH
6,2 6,2 5,0 5,0
Biomek FX/PAMPA Evolution96 Kurzübersicht und Fehlersuchtabelle
.
.
.
NaOH (ml)
4,5
7,3
10,2
10 11 12
pH pH pH
5,0 5,0
A29703AB