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Nota: Una vez que las
muestras se encuentran en
los pozos, tener cuidado de
no sacudir los sándwiches de
forma que las muestras no se
derrame o mezclado.
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Preparar la muestra
Aumentar la densidad de líquido de muestra con 10%
de glicerol o sacarosa. Añadir un tinte de seguimiento
como el rojo fenol, azul de bromofenol, o Y. pironina
Para geles de proteínas SDS, utilice 2X tampón de
tratamiento para desnaturalizar muestras líquidas y
en seco en un tubo de ensayo.
Para soluciones de proteínas líquidas, añadir un volu-
men igual de tampón de 2X.
Para secar las muestras de proteínas, añadir
volúmenes iguales de tampón de muestra 2X y
agua de alta pureza para alcanzar la concentración
deseada.
3
Se calienta el tubo en agua hirviendo durante 90
segundos, luego se deja enfriar a temperatura ambi-
ente. Las muestras tratadas se pueden almacenar a
-40 a -80 °C durante carreras futuras.
Proteínas de membrana de calor a 60 °C durante 20
minutos. No conserve la muestra utilizada a 4 °C.
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Sirvieron de base al de la muestra en los pocillos
utilizando una microjeringa de punta fina o un gel de
carga punta de la pipeta.
Tabla 1. Volumen de la muestra para el estándar de
tamaños de peine, volumen de la muestra (l) por la
profundidad de 1 mm
número
de pozos
10
12
15
20
28
1/1 (ref/prep)
1/2 (ref/prep)
espesor de peine (mm)
0,75
1,0
6,2
8,3
5,8
7,7
4,3
5,7
3,1
4,1
2,1
2,7
4/90
6/121
4/85
6/112
1,5
12,4
11,5
8,6
6,2
4,1
9/183
9/171
•
p17
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