La Separación De La Muestra; Corriente - Hoefer SE600 Chroma Manual Del Usuario

Nota: SE600 unidad de Chroma
utiliza de 18 cm de ancho
placas. El espesor de gel
determina la sección transversal
(y el requisito de corriente) para
constantes carreras actuales. La
longitud de la placa determina
el tiempo de ejecución.
Tabla 2: Sistema de tampón
de Laemmli partida
directrices punto
Gel de espesor*
Actual por gel †
A partir de tensión ‡
Tensión final
* Geles más gruesas o más delgada
requieren proporcionalmente más o menos
corriente. Por ejemplo, un gel de 0,75 mm,
que es la mitad del grosor de un gel de
1,5 mm, requiere la mitad como mucho de
corriente, o mA 12,5.
†
La corriente debe ser multiplicado por
el número de geles. Por ejemplo, si dos
sándwiches están instalados, los cuatro
geles requieren cuatro veces más actual.
La corriente se puede aumentar más
rápidas carreras si se utiliza enfriamiento
activo y puede ser disminuido por más
lentas carreras durante la noche.
‡ A los 25 mA por gel.
1.5 mm
25 mA

corriente

constante
80 – 90 V
220 – 250 V
La separación de la muestra
Electrophoresis parameters for
discontinuous polyacrylamide gels
Los geles se pueden ejecutar en contextos de
tensión constante de corrientes o constantes.
Un modo de corriente constante se utiliza tradi-
cionalmente con un sistema de tampón discon-
tinuo de modo que la velocidad de migración
electroforética permanece inalterada a lo largo
de la carrera. Bajo estas condiciones la tensión
aumenta a medida que los ingresos de ejecución.
Un valor más bajo en curso se recomienda
para una mayor resolución. El nivel óptimo de
corriente se debe determinar empíricamente;
los principales factores que deben equilibrarse
incluyen la concentración del gel y la velocidad
de migración, y el calentamiento Joule y la dis-
torsión resultante banda. En la tabla 2 como
punto de partida las directrices y los ajustes de
grosor del gel, el número de geles, y la tasa de
migración.
Corriente
Actos corrientes sobre el total de área de sec-
ción transversal de todos los geles porque los
geles están conectados en paralelo en el circuito
eléctrico. Así, la configuración actual de un gel
debe ser multiplicado por el número de geles de
la misma sección transversal de ejecución simul-
táneamente. Para un gel de 1,5 mm de espesor,
se aconseja un ajuste de la corriente de arranque
de 25 mA. (Dos de 1,5 mm de geles = 50 mA.)
Nota: Puede ser necesario enfriar para controlar
el calentamiento Joule.
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