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Precaución: Después de
monitoreo inicial, no deje la
unidad sin usar por más de
1 hora antes de comprobar el
progreso de las bandas y el nivel
de amortiguación.
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Voltaje
El voltaje de partida para un gel de 1,5 mm de
losa conectado a una fuente de alimentación
ajustado a 25 mA es generalmente 80-90 V (uti-
lizando la unidad SE600 croma con un sistema
tampón de Laemmli discontinua para geles de
SDS). El voltaje final es típicamente 250 a 400 V,
dependiendo de la longitud del gel. (Ver Tabla 2.)
Tiempo
Una ejecución generalmente se completa cuando
el colorante de rastreo alcanza la parte inferior
del gel. En un gel de 16 cm (SE600 croma), un
1,5 mm de espesor de Laemmli en gel de SDS,
que funcionaba a 25 mA / gel sin enfriamiento,
por lo general requiere 5 horas.
Registre cada carrera
Mantenga un registro de la configuración de cor-
riente o voltaje, el número y el grosor de los geles,
sistema de amortiguación, y las lecturas inicial y
final de corriente o voltaje para cada carrera para
que los resultados pueden ser comparados. Los
resultados inconsistentes para el mismo sistema
y la configuración de indicar posibles problemas
como la filtración de las concentraciones actuales
de búfer incorrecto, las altas concentraciones de
sal, o la calidad química inconsistente.
Comprobar el progreso de la banda después
de 5 minutos, y de nuevo después de una hora,
manteniendo un ojo en la tasa de migración
del colorante de seguimiento. La carrera se
completa cuando el colorante de rastreo alcanza
la parte inferior del gel. Ver el nivel de amor-
tiguación y, si es necesario, reponer según sea
necesario para mantener el electrodo superior
sumergido. (Un pequeño volumen de tampón
puede filtrarse pasado una placa de muescas o
junta, o tampón puede pasar a través del gel.)
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