Principio Del Ensayo - Greiner Bio-One PapilloCheck Manual De Instrucciones

6.3

Principio del ensayo

PapilloCheck es un equipo de ensayo basado en micromatrices para la detección y la genotipificación
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de un fragmento del gen E1 del genoma del virus del papiloma humano (VPH). El procedimiento del
ensayo se resume en la figura 1.
Antes del análisis PapilloCheck
La toma de muestras y la extracción de ADN no forman parte del equipo de ensayo PapilloCheck
Greiner Bio-One también ofrece productos especializados para la toma de muestras (equipo de
toma de muestras PapilloCheck
se deben adquirir por separado (consulte la información sobre pedidos en el capítulo 2).
Después de la extracción de ADN genómico humano y vírico de una muestra cervicouterina, se
amplifica un fragmento de 350 bp del gen E1 vírico mediante la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) en presencia de un conjunto de cebadores específicos del VPH. En la misma reacción, se
amplifica un fragmento de una copia del gen humano ADAT1 (adenosina desaminasa específica del
ARNt humano1) con el fin de controlar la presencia de material de muestra humano en la muestra
cervicouterina (control de muestra) y una plantilla de control interna presente en el PapilloCheck
PCR MasterMix para controlar el rendimiento de la PCR (control de PCR). Además, el PapilloCheck
PCR MasterMix contiene dUTP. Por tanto, se puede eliminar la contaminación cruzada de reacciones
PCR anteriores mediante el uso del tratamiento con uracil-N-glucosilasa (UNG) (consulte el
capítulo 8.2.2).
A continuación, los productos de la PCR se hibridan según sondas de ADN específicas y controles
en el microchip enlazados a la superficie del microchip de PapilloCheck
12 micromatrices de ADN, lo que permite el análisis simultáneo de 12 muestras cervicouterinas.
Durante la hibridación, el ADN unido se marca de forma fluorescente y el no unido se elimina en los
pasos de lavado subsiguientes. Se supervisa la eficiencia de la hibridación (control de hibridación).
PapilloCheck
Finalmente, el microchip PapilloCheck
CheckScanner y el software CheckReport
TM
pedidos en el capítulo 2). CheckScanner
Manual de instrucciones
excitación de 532 nm y 635 nm), que permite la detección de la señal fluorescente generada por
la presencia de productos de la amplificación específicos de VPH así como los controles (consulte
el capítulo 6.4.2). El software CheckReport
y muestra de forma automática los valores correspondientes tanto de los tipos de VPH detectados
como de los controles en un informe detallado.
El informe indica claramente la presencia o la ausencia de uno o varios de los 24 tipos de VPH
detectables y los completos controles en el microchip garantizan la elevada fiabilidad del análisis.
Equipo de diagnóstico para la genotipificación de los tipos del virus del papiloma humano
6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 40, 42, 43, 44/55, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 en
muestras cervicouterinas
REF 465 060
Para uso diagnóstico in vitro
únicamente por parte de personal de laboratorio profesional
Greiner Bio-One GmbH
Maybachstr. 2 • 72636 Frickenhausen • Alemania
Teléfono: +49 (0) 7022 948-0 • Fax +49 (0) 7022 948-514
info@de.gbo.com • www.gbo.com/bioscience
PapilloCheck - Manual de instrucciones
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Revisión: BQ-013-07 / Agosto de 2011
, se debe extraer ADN de una muestra de citología cervicouterina.
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) y la extracción de ADN (equipo de extracción de ADN oCheck
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se escanea, analiza y evalúa de forma automática mediante
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, respectivamente (consulte la información sobre
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es un escáner láser bicolor (longitudes de onda de
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permite visualizar, analizar y evaluar los resultados,
TM
H P V D N A - C h i p
. Cada microchip contiene
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.
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);
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