Controles Del Microchip - Greiner Bio-One PapilloCheck Manual De Instrucciones

6.4.2

Controles del microchip

El diseño del microchip de ADN PapilloCheck
en el microchip. Varios sistemas de control supervisan todos los pasos críticos del ensayo y el
procesamiento del microchip, lo que incluye la calidad de la muestra y la extracción de ADN (control
de muestra), la calidad de la reacción PCR (control de PCR), la eficiencia de la hibridación (control
de hibridación), así como la homogeneidad de las marcas y la calidad de impresión (control de
orientación y control de impresión). Además de la presencia o ausencia de los tipos de VPH, el
software CheckReport™ muestra de forma automática tanto los valores correspondientes de
los controles como los tipos de VPH detectados en un informe detallado. Para la lectura de los
diferentes controles, se utilizan ambas longitudes de onda de excitación de CheckScanner™. Para
el control del rendimiento del ensayo (control de muestra y de PCR), se usa el canal rojo (longitud
de onda de excitación de 635 nm), mientras que la calidad de la hibridación y el microchip (control
de hibridación, orientación e impresión) se evalúa en el canal verde (longitud de onda de excitación
de 532 nm).
Control de muestra
PapilloCheck controla la calidad de la muestra y/o la extracción de ADN mediante la amplificación
®
de un fragmento de una copia del gen humano ADAT1 (adenosina desaminasa específica del ARNt
humano1). Si hay presente ADN humano en una cantidad adecuada en el ADN extraído de la
muestra cervicouterina, se genera una señal fluorescente en las marcas de control de muestra.
Si la amplificación de ADAT1 es insuficiente o inexistente, el software CheckReport™ indicará el
error en el control de muestra (Failed) y se deberá repetir el análisis, como consecuencia de una
cantidad insuficiente de células en la muestra cervicouterina y/o el rendimiento insuficiente de la
extracción (consulte el capítulo 9).
Control de PCR
PapilloCheck PapilloCheck también controla la calidad de la reacción PCR. La amplificación de una plantilla
®
de control interna presente en el PapilloCheck
de control de PCR en el microchip PapilloCheck
de amplificación automáticamente en el software CheckReport™. Si el rendimiento de la PCR es
Manual de instrucciones
inferior a un umbral predefinido, el software CheckReport™ indicará el error en el control de PCR
(Failed) y se deberá repetir el análisis (consulte el capítulo 9).
Si la cantidad de ADN de VPH en la muestra es muy elevada, la señal fluorescente de las marcas
de control de PCR puede ser débil o incluso no aparecer, como consecuencia de la competición
durante la reacción PCR. En este caso, la señal fluorescente de al menos una sonda especifica de
VPH debe superar un umbral predefinido para que el ensayo se considere válido.
Control de hibridación
Equipo de diagnóstico para la genotipificación de los tipos del virus del papiloma humano
PapilloCheck controla la eficiencia de la hibridación mediante una sonda marcada con fluorescencia
®
6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 40, 42, 43, 44/55, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 70, 73, 82 en
en el tampón de hibridación PapilloCheck
muestras cervicouterinas
el microchip PapilloCheck
fluorescentes en cada marca de la matriz. Los resultados de cinco marcas de control de hibridación
REF 465 060
en el microchip PapilloCheck
Para uso diagnóstico in vitro
únicamente por parte de personal de laboratorio profesional
Control de orientación y de impresión
Las marcas de control de orientación del microchip PapilloCheck
con independencia de la eficiencia del proceso de hibridación. Estas marcas se usan en el software
CheckReport como puntos de guía para la búsqueda de marcas correctas, que es un requisito
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previo para analizar las señales correctamente. Además, se controla la calidad del proceso de
Greiner Bio-One GmbH
impresión mediante la presencia de una señal fluorescente verde en cada marca del microchip
Maybachstr. 2 • 72636 Frickenhausen • Alemania
(control de impresión).
Teléfono: +49 (0) 7022 948-0 • Fax +49 (0) 7022 948-514
info@de.gbo.com • www.gbo.com/bioscience
PapilloCheck - Manual de instrucciones
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Revisión: BQ-013-07 / Agosto de 2011
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PCR MasterMix genera una señal en las marcas
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, que hibrida según secuencias de ADN específicas en
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. Una hibridación con la eficiencia adecuada da como resultado señales
®
también se evalúan mediante el software CheckReport
®
incorpora unos completos controles integrados
. Además, se evalúa la calidad de la reacción
®
generan señales fluorescentes
®
H P V D N A - C h i p
.
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