BD ESwab Manual Del Usario página 25

Abb. 5 Vorgehensweisen zur Inokulation von festem Agar in Petrischalen mit BD ESwab-Proben
1. Probeninokulation mit dem Tupfer
Abb. 6 Verfahren zum Ausstreichen von BD ESwab-Proben auf Petrischalen mit Agar für die Primärisolierung
Erster Zweiter
Quadrant Quadrant
Proben
Vierter
Dritter
Quadrant
Quadrant
Vorbereitung von gramgefärbten Ausstrichen der BD ESwab-Proben
Laboranalysen klinischer Abstrichproben, die an bestimmten Stellen des Patienten entnommen wurden, beinhalten
möglicherweise routinemäßig die mikroskopische Untersuchung von Proben, die mit dem Gramfärbungsverfahren
aufbereitet wurden (Direktausstriche). Dadurch erhalten Ärzte, die Patienten mit Infektionskrankheiten behandeln, unter
Umständen wertvolle Informationen.
beispielsweise bei Abstrichen der Endozervix oder der männlichen Harnröhre, bei Verdacht auf Neisseria gonorrhoeae-
Infektionen oder bei Vaginalabstrichen zur Diagnose bakterieller Vaginose.
der Probenqualität und der Auswahl von Kulturmedien insbesondere mit gemischter Flora hilfreich.
Mikroskop-Objektträger mit Patientenproben, die im BD ESwab-Transportsystem transportiert werden, können wie
nachfolgend beschrieben für die Gramfärbungsanalyse aufbereitet werden, indem Proben einer Teilmenge der mit dem
Vortexmischer gemischten Suspension des Abstrichs genommen werden.
1. Nehmen Sie einen sauberen Mikroskop-Objektträger, legen Sie ihn auf eine ebene Fläche, und markieren Sie einen Bereich
mit einer Diamantspitze oder einem ähnlichen Glasmarkierer, um die Position des Probeninokulums zu kennzeichnen.
2. Mischen Sie das BD ESwab-Röhrchen, in dem die Abstrichprobe enthalten ist, 5 s lang mit einem Vortexmischer
oder einem anderen Verfahren, um die Patientenprobe von der Tupferspitze zu lösen und gleichmäßig im flüssigen
Transportmedium zu dispergieren und zu suspendieren.
3. Schrauben Sie die BD ESwab-Verschlusskappe ab, und geben Sie 1–2 Tropfen des flüssigen Amies-Mediums mit einer
sterilen Pipette auf den markierten Bereich auf dem Objektträger.
4. Lassen Sie die Probe auf dem Objektträger an der Luft trocknen, oder legen Sie den Objektträger in ein 60 °C warmes
elektrisches Wärmegerät für Objektträger.
5. Die Ausstriche können mit Hitze oder Methanol fixiert werden. Die Fixierung mit Methanol ist eventuell vorzuziehen, da sie
die Lyse der roten Blutzellen verhindert, die Wirtszellen nicht schädigt und zu einem saubereren Hintergrund führt.
6. Befolgen Sie bei der Durchführung der Gramfärbung die veröffentlichten labortechnischen Referenzhandbücher
und Richtlinien. Wenn im Handel erhältliche Gramfärbungsreagenzien verwendet werden, ist es wichtig, die
Herstelleranweisungen auf der Packungsbeilage für das Leistungstestverfahren genau zu befolgen.
Detaillierte Informationen oder Anleitungen zur Vorbereitung von Objektträgern mit Proben für die mikroskopische Analyse
sowie Informationen über Gramfärbungsverfahren und die Interpretation und Erfassung von Ergebnissen der mikroskopischen
Analyse können den veröffentlichten labortechnischen Referenzhandbüchern entnommen werden.
QUALITÄTSKONTROLLE
BD ESwab-Kits aller Chargennummern werden auf Sterilität getestet, und die Abstrichapplikatoren werden auf Nichttoxizität
für Bakterien überprüft. Das flüssige Amies-Transportmedium des BD ESwab-Kits wird auf pH-Stabilität und mithilfe einer
mikroskopischen Gramfärbungsuntersuchung auf die Keimzahl getestet, um akzeptable Werte gemäß dem Approved Standard
M40-A des Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) sicherzustellen.
wird vor der Freigabe unter Verwendung der Roll-Plate- und der Swab-Elution-Methode einer Qualitätskontrolle im Hinblick
auf die Fähigkeit zur Erhaltung der Lebensfähigkeit verschiedener aerober, anaerober und anspruchsvoller Bakterien
sowohl bei Kühltemperatur (4–8 °C) als auch bei Raumtemperatur (20–25 °C) zu bestimmten Zeitpunkten unterzogen.
Lebensfähigkeitsstudien umfassen zudem eine Bewertung der bakteriellen Überwucherung bei Kühltemperatur (4–8 °C), die
bei einem Anstieg von ≤1 log zu einem bestimmten Zeitpunkt liegen sollte. Qualitätskontrollverfahren (unter Verwendung der
quantitativen Swab-Elution-Methode und der qualitativen Roll-Plate-Methode) für bakteriologische Transportinstrumente sind
im Dokument CLSI M40-A und anderen Publikationen beschrieben.
Qualitätskontrolle die Patientenergebnisse nicht verwenden.
2. Inokulation von 100 µL Probensuspension
mit dem Pipettierer und sterilen Pipettierspitzen
Beimpfen Sie ein geeignetes Kulturmedium mit einem Primärinokulum der BD ESwab-Probe.
Befolgen Sie dabei die empfohlenen Mikrobiologieverfahren.
Verwenden Sie eine sterile Impföse, um das Primärinokulum auf der Oberfläche
auszustreichen und die Organismen auf dem Kulturmedium zu isolieren.
24 In vielen Fällen kann eine Gramfärbung bei der Erstellung der Diagnose hilfreich sein,
25-30 Die Gramfärbung ist auch bei der Beurteilung
17,31
Jedes Produktionslos des BD ESwab-Kits
4
4,5,7,8,32-34 Bei Auftreten abweichender Ergebnisse der
25
23
31
17,24,31
16,21,22,24,31
4 Die