Contaminación Controlada Y Destilación; Desinfección; Muestreo Para La Determinación Del Recuento De Gérmenes - Buchi Rotavapor R-220 SE Manual De Instrucciones

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Para el test se usó la siguiente configuración:
Instrumento del test: Rotavapor R-220 SE, configuración del sistema D con Bomba de vacío V-710 y
recirculador.
Las dos válvulas de aireación se cerraron con un filtro aséptico Sartorius Midisart 2000, 0.45 µm ay en
la linea de vacío entre la bomba y el equipo se fijó un filtro interno PAL Kleenpak 1.2 µm.
Para el test se usaron los siguientes contaminantes representativos:
• Escherichia coli ATCC 25922
• Staphylococcus aureus subsp. Aureus ATCC 25923
• Saccharomyces cerevisiae NCYC 79
• Geobacillus stearothermophilus
Para cada agente contaminante se aplicó las siguientes concentraciones por germen:
103 gérmenes/ml
104 gérmenes/ml
105 gérmenes/ml
106 gérmenes/ml
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Contaminación controlada y destilación
Se introdujo 5 l de agua destilada estéril en el matraz de evaporación, se añadió agente contaminante
para alcanzar las concentraciones por germen correspondientes y se destiló un 1 l bajo las siguientes
condiciones:
Baño calefactor ajustado a 60 °C, vacío ajustado a 42 mbares (corresponde a un punto de ebullición
del agua de 30 °C), refrigerador ajustado a 7 °C.
A continuación, se tomó una muestra de destilado (muestra 1 de la tabla) por medio de una pipeta y
una botella estériles para determinar el recuento de gérmenes
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Desinfección
El matraz de evaporación y el receptor se vaciaron y el matraz de evaporación se enjuagó con agua.
Se añadió 1,5 l de isopropanol al matraz de evaporación y se inició la evaporación bajo las siguientes
condiciones:
Baño calefactor ajustado a 60 °C, vacío ajustado a 250 mbares (corresponde a un punto de ebullición
del isopropanol de 50 °C), refrigerador ajustado a 7 °C.
Primero, se desconectó el refrigerador hasta que el vapor había pasado por todo el instrumento.
A continuación, se conectó el refrigerador de nuevo y se destilaron 0,75 l. Después, se vaciaron el
matraz de evaporación y el receptor y el instrumento se secó con un vacío de < 20 mbares.
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Muestreo para la determinación del recuento de gérmenes
El matraz de evaporación se llenó con 2 l de agua destilada estéril y 0,75 l se destilaron bajo las
siguientes condiciones:
Baño calefactor ajustado a 60 °C, vacío ajustado a 42 mbares (corresponde a un punto de ebullición
del agua de 30 °C), refrigerador ajustado a 7 °C.
Se tomó una muestra del destilado (muestra 2 de la tabla) y del residuo dentro del matraz de evapo-
ración (muestra 3 de la tabla) para determinar el recuento de gérmenes.
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5 Puesta en marcha
R-220 SE Manual de instrucciones, versión H

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