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Principios de funcionamiento
PCR en tiempo real
3-6
Línea de amplificación en tiempo real
Una línea de amplificación corresponde a la línea de señal de
fluorescencia o a la curva de crecimiento de fluorescencia de
PCR en relación con el número de ciclo. En los ciclos iniciales
de la PCR, ésta continúa con el crecimiento exponencial, pero
la cantidad de copias objetivo es pequeño. Por ello, el cambio
de la señal de fluorescencia es leve o no detectable. Esta región
de la línea de amplificación se denomina comúnmente "región
de referencia". A medida que continúa la permutación cíclica,
la señal de fluorescencia supera la referencia y aumenta en
forma exponencial. La velocidad de crecimiento comenzará
a disminuir y muestra varios ciclos de crecimiento lineal.
Al final, la velocidad de crecimiento de la señal disminuirá
aun más, ingresando a una fase de meseta.
A continuación, se muestra una línea típica de amplificación
en tiempo real, identificando las fases características
de la curva de crecimiento.
Figura 3.1:
R
n
Fase exponencial
Región de referencia
Línea de amplificación de PCR en tiempo real
Muestra
Fase lineal
Número de ciclo
Sección 3
Fase de meseta
Sin control de plantilla
Manual de funcionamiento del m2000rt
50-608336/R2—Julio de 2010
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