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Printed For Final Review: 10/10/03
ECO Number: 27341
9.4 Agite los tubos suavemente en vórtex sin que se forme espuma e incube
durante 15 (±5) minutos a 20-25° C.
9.5 Añada 200 µL de PTH-MM II
9.6 Agite los tubos suavemente en vórtex sin que se forme espuma e incube
durante 2 horas (±15 minutos) a 2-8° C (refrigerador o baño de hielo picado).
9.7 Mezcle enérgicamente el DAG-PPT; añada 500 µL a todos los tubos salvo a
los de cuentas totales.
9.8 Agite los tubos suavemente en vórtex sin que se forme espuma e incube
durante 15 (±5) minutos a 20-25° C.
9.9 Centrifugue los tubos durante 20 minutos con un mínimo de 760 x g* a 20-25° C.
9.10 Decante inmediatamente el sobrenadante de todos los tubos, salvo los de las
cuentas totales, invirtiéndolos durante dos minutos como máximo. Antes de
poner los tubos boca arriba, séquelos con papel secante para eliminar las
gotas de sobrenadante que puedan haber quedado en los bordes.
9.11 Determine el número de cuentas de precipitado de cada tubo y de los tubos
de cuentas totales dejándolos en un contador de centelleo de rayos gamma
durante el tiempo suficiente para obtener precisión estadística (consulte los
resultados en el apartado Limitaciones del procedimiento).
10. COMENTARIOS SOBRE EL PROCEDIMIENTO
10.1 Añada cada alícuota de reactivo al tercio inferior del tubo de ensayo para
asegurar la mezcla completa de los reactivos.
10.2 Los tubos desechables de vidrio de borosilicato de algunos fabricantes
producen uniones no específicas elevadas.
10.3 Si prefiere aspirar el sobrenadante del precipitado, tenga cuidado de no alterar
el precipitado.
10.4 Para asegurar completamente el resultado sólido del ensayo RIA, deben
comprobarse varios factores adicionales. DiaSorin recomienda comprobar los
siguientes parámetros para asegurar los resultados uniformes del equipo.
a.
Cuentas totales
b.
Unión máxima
Promedio de cuentas por minuto (CPM) del tubo de calibrador
0 / Promedio de CPM de los tubos de cuentas totales
c.
Uniones no específicas
Promedio de CMP del tubo NSB / Promedio de CPM de los tubos de
cuentas totales
d.
Pendiente de la curva de calibración
Por ejemplo, controle los puntos de inhibición de 80, 50 y 20% de la línea
de calibración.
11. CONTROL DE CALIDAD
Cada laboratorio debe incluir al menos dos sueros de control en cada ensayo para
asegurar la validez de los resultados obtenidos. Debe determinarse una desviación
media y estándar para cada control con un mínimo de diez ensayos. De este modo se
puede obtener un rango aceptable de valores para estos controles usando ±2
desviaciones estándar de los valores previamente determinados. El laboratorio de
control de calidad de DiaSorin ha determinado un rango para los sueros de control que
se incluyen en este equipo.
* g = (1118 x 10
) (radio en cm) (rpm)
-8
10:45 AM
I a todos los tubos.
125
2
37
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