3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 222

ค� ำ แนะน� ำ ส� ำ หรั บ กำรใช้ ง ำน
ปฏิ บ ั ต ิ ต ำมค� ำ แนะน� ำ ทั ้ ง หมดอย่ ำ งละเอี ย ดรอบคอบ หำกไม่ ป ฏิ บ ั ต ิ เ ช่ น นั ้ น อำจจะให้ ผ ลที ่ ไ ม่ ถ ู ก ต้ อ งแม่ น ย� ำ ได้
ขจั ด กำรปนเปื ้ อ นบริ เ วณโต๊ ะ ปฏิ บ ั ต ิ ง ำนและอุ ป กรณ์ ใ นห้ อ งปฏิ บ ั ต ิ ก ำร (ปิ เ ปตต์ เครื ่ อ งมื อ เปิ ด /ปิ ด ฝำ ฯลฯ) เป็ น ระยะๆ ด้ ว ยสำรละลำยฟอกจำงที ่
ใช้ ใ นครั ว เรื อ นหรื อ สำรละลำยก� ำ จั ด DNA ที ่ ม ี ค วำมเข้ ม ข้ น 1-5% (ปริ ม ำตร:ปริ ม ำตรในน� ้ ำ )
ตั ว อย่ ำ งอำหำร
3M แนะน� ำ ให้ ใ ช้ อ ำหำรเลี ้ ย งเชื ้ อ ชนิ ด เหลว Modified Listeria Recovery Broth ของ 3M (ตำรำงที ่ 2) หรื อ เดมิ เ ฟรเซอร์ บ รอทเบสและเฟรเซอร์
บรอทเบส (ตำรำงที ่ 3) ส� ำ หรั บ ตั ว อย่ ำ งอำหำรเลี ้ ย งเชื ้ อ เสริ ม และตั ว อย่ ำ งทำงสิ ่ ง แวดล้ อ ม
ค� ำ เตื อ น: ห้ ำ มใช้ เ ดมิ เ ฟรเซอร์ บ รอทเบสหรื อ เฟรเซอร์ บ รอทเบสที ่ ม ี ส ่ ว นประกอบเป็ น เฟอร์ ร ิ ก แอมโมเนี ย ซิ เ ตรต (FAC) ไม่ ว ่ ำ จะเป็ น แบบที ่ ม ำ
พร้ อ มกั บ อำหำรเลี ้ ย งเชื ้ อ ชนิ ด เหลวอยู ่ แ ล้ ว หรื อ ใส่ เ สริ ม เข้ ำ ไปเมื ่ อ ใช้ ช ุ ด ทดสอบ เชื ้ อ ลี ส ที เ รี ย ระดั บ โมเลกุ ล โดยวิ ธ ี 3M
เพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ
ตำรำงที ่ 2 และ 3 แสดงค� ำ แนะน� ำ ส� ำ หรั บ ตั ว อย่ ำ งอำหำรเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ ปริ ม ำณ 25 ก. โดยท� ำ เจื อ จำงในอั ต รำส่ ว น 1:10 ผู ้ ใ ช้ ม ี ห น้ ำ ที ่
รั บ ผิ ด ชอบในกำรพิ ส ู จ น์ ย ื น ยั น ระเบี ย บกำรสุ ่ ม ตั ว อย่ ำ งหรื อ อั ต รำส่ ว นกำรเจื อ จำงแบบอื ่ น เพื ่ อ ให้ ค วำมเชื ่ อ มั ่ น ว่ ำ วิ ธ ี ก ำรทดสอบนี ้ ส อดคล้ อ งกั บ
เกณฑ์ ข องผู ้ ใ ช้ ง ำนเอง
• อุ ่ น อำหำรเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ ให้ ม ี อ ุ ณ หภู ม ิ ท ี ่ 37 ± 1°C
• ผสมอำหำรเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ กั บ ตั ว อย่ ำ งเข้ ำ ด้ ว ยกั น โดยใช้ ว ิ ธ ี ก ำรแบบปลอดเชื ้ อ ส� ำ หรั บ ตั ว อย่ ำ งเนื ้ อ สั ต ว์ แ ละตั ว อย่ ำ งที ่ ล ั ก ษณะเป็ น ละออง
อนุ ภ ำคสู ง ทุ ก ชนิ ด แนะน� ำ ให้ ใ ช้ ถ ุ ง กรอง บดให้ เ ป็ น เนื ้ อ เดี ย วกั น ให้ ท ั ่ ว เป็ น เวลำ 2 นำที โดยกำรใช้ เ ครื ่ อ งตี บ ดผสมอำหำร เครื ่ อ งปั ่ น อำหำร
หรื อ ใช้ ม ื อ นวดให้ เ ข้ ำ กั น บ่ ม เชื ้ อ ที ่ อ ุ ณ หภู ม ิ 37 ± 1°C (ดู ต ำรำงที ่ 2 และ 3)
• ส� ำ หรั บ กำรใช้ เ ดมิ เ ฟรเซอร์ บ รอทเบสเท่ ำ นั ้ น หำกจ� ำ เป็ น ให้ ว ั ด ถ่ ำ ยอำหำรเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ ปฐมภู ม ิ ป ริ ม ำณ 0.1 มล. ใส่ ใ นเฟรเซอร์ บ รอทเบส
ปริ ม ำณ 10.0 มล. (ดู ต ำรำงที ่ 3) บ่ ม เชื ้ อ ที ่ อ ุ ณ หภู ม ิ 37 ± 1°C เป็ น เวลำ 24-26 ชั ่ ว โมง
ตั ว อย่ ำ งจำกสิ ่ ง แวดล้ อ ม
อุ ป กรณ์ เ ก็ บ ตั ว อย่ ำ งอำจจะเป็ น ฟองน� ้ ำ ที ่ ช ุ ่ ม ด้ ว ยสำรละลำยส� ำ หรั บ ท� ำ ให้ เ ป็ น กลำงเพื ่ อ ยั บ ยั ้ ง ฤทธิ ์ อ ั น เป็ น ผลของสำรฆ่ ำ เชื ้ อ บริ ษ ั ท 3M แนะน� ำ
ให้ ใ ช้ ฟ องน� ้ ำ ชนิ ด เซลลู โ ลสที ่ ไ ร้ ส ำรฆ่ ำ เชื ้ อ โรค สำรละลำยส� ำ หรั บ ท� ำ ให้ เ ป็ น กลำงอำจจะเป็ น อำหำรเหลวส� ำ หรั บ ท� ำ ให้ เ ป็ น กลำงชนิ ด เดย์ - อิ ง ลี
(D/E) ก็ ไ ด้ แนะน� ำ ให้ ฆ ่ ำ เชื ้ อ บริ เ วณดั ง กล่ ำ วหลั ง จำกสุ ่ ม ตั ว อย่ ำ งแล้ ว
ค� ำ เตื อ น: หำกคุ ณ เลื อ กที ่ จ ะใช้ บ ั ฟ เฟอร์ ส � ำ หรั บ ท� ำ ให้ เ ป็ น กลำง (NB) ซึ ่ ง ประกอบด้ ว ยสำรเชิ ง ซ้ อ นของเอริ ล ซั ล โฟเนตเป็ น สำรละลำยในกำร
ท� ำ ให้ ฟ องน� ้ ำ ชุ ่ ม ชื ้ น ก� ำ หนดให้ ต ้ อ งด� ำ เนิ น กำรท� ำ เจื อ จำงตั ว อย่ ำ งทำงสภำพแวดล้ อ มที ่ เ พิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ แล้ ว ในอั ต รำส่ ว น 1:2 (ตั ว อย่ ำ ง 1 ส่ ว น
ในอำหำรเหลวเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ ที ่ ฆ ่ ำ เชื ้ อ แล้ ว 1 ส่ ว น) ก่ อ นกำรทดสอบเพื ่ อ ที ่ จ ะลดควำมเสี ่ ย งอั น เกี ่ ย วข้ อ งกั บ ผลลบที ่ เ ป็ น เท็ จ ซึ ่ ง น� ำ ไปสู ่ ก ำร
ปล่ อ ยผลิ ต ภั ณ ฑ์ ท ี ่ ป นเปื ้ อ นออกสู ่ ภ ำยนอกได้
พื ้ น ที ่ ส ุ ่ ม ตั ว อย่ ำ งเพื ่ อ ยื น ยั น กำรมี ห รื อ ไม่ ม ี เ ชื ้ อ ก่ อ โรคบนพื ้ น ผิ ว ควรมี ข นำดอย่ ำ งน้ อ ย 100 ตร.ซม.
ด้ ว ยฟองน� ้ ำ ให้ ท � ำ ให้ ต ั ว อย่ ำ งครอบคลุ ม ทั ่ ว พื ้ น ที ่ ใ นสองทิ ศ ทำง (จำกซ้ ำ ยไปขวำ ตำมด้ ว ยจำกบนลงล่ ำ ง) หรื อ ให้ เ ก็ บ ตั ว อย่ ำ งจำกสิ ่ ง แวดล้ อ ม
โดยใช้ ว ิ ธ ี ก ำรสุ ่ ม ตั ว อย่ ำ งในปั จ จุ บ ั น ของท่ ำ น หรื อ ท� ำ ตำมแนวทำงของ FDA BAM
1. อุ ่ น อำหำรเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ ให้ ม ี อ ุ ณ หภู ม ิ ท ี ่ 37 ± 1°C
2. ผสมอำหำรเพิ ่ ม จ� ำ นวนเชื ้ อ กั บ ตั ว อย่ ำ งเข้ ำ ด้ ว ยกั น โดยใช้ ว ิ ธ ี ก ำรแบบปลอดเชื ้ อ คนให้ เ ป็ น เนื ้ อ เดี ย วกั น ให้ ท ั ่ ว โดยกำรใช้ เ ครื ่ อ งตี บ ดผสม
อำหำร เครื ่ อ งปั ่ น อำหำรหรื อ ใช้ ม ื อ นวดให้ เ ข้ ำ กั น ส� ำ หรั บ กำรใช้ อ ำหำรเลี ้ ย งเชื ้ อ ชนิ ด เหลว Modified Listeria Recovery Broth ของ 3M บดให้
เป็ น เนื ้ อ เดี ย วกั น เป็ น เวลำ 2 ± 0.2 นำที ส� ำ หรั บ กำรใช้ เ ดมิ เ ฟรเซอร์ บ รอทเบส ให้ บ ดเป็ น เนื ้ อ เดี ย วกั น เป็ น เวลำ 30 วิ น ำที บ่ ม เชื ้ อ ที ่ อ ุ ณ หภู ม ิ
37 ± 1°C (ดู ต ำรำงที ่ 2 และ 3)
(10 ซม. x 10 ซม. หรื อ 4"x4") เมื ่ อ สุ ่ ม ตั ว อย่ ำ ง
2
หรื อ ISO 18593
(1) , USDA FSIS MLG (2)
4
TH (ภาษาไทย)
(6)