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Normalización de tubo dinámico
La opción "Dynamic Tube" (Tubo dinámico) está
seleccionada por defecto y se utiliza para determinar
el fondo medio de cada muestra justo antes de iniciar
la amplificación.
La normalización estándar simplemente toma los
cinco primeros ciclos y los utiliza como indicador del
nivel de fondo de cada muestra. A continuación,
todos los puntos de datos para la muestra se dividen
por este valor para normalizar los datos. Esto puede ser
impreciso porque para determinadas muestras el nivel
de fondo a lo largo de cinco ciclos puede no ser
indicativo del nivel de fondo justo antes de la
amplificación. A diferencia de ello, la normalización
de tubo dinámico utiliza la segunda derivada de
cada trazo de la muestra para determinar un punto
de partida para cada muestra. A continuación se
calcula el promedio del nivel de fondo desde el ciclo
1 hasta este número de ciclo de partida para cada
muestra. Este método proporciona los resultados de
cuantificación más precisos.
Tenga en cuenta que para determinados sets de
datos la fluorescencia de fondo no es uniforme
durante los ciclos antes de que comience la
amplificación. En estos casos puede ser necesario
desactivar la normalización de tubo dinámico
haciendo clic en "Dynamic Tube", ya que podría
reducir la precisión de la cuantificación.
Manual del usuario Rotor-Gene Q MDx 09/2018
Para las concentraciones calculadas se utiliza la
media geométrica en lugar de la media
aritmética. Esta tiene en cuenta la naturaleza
exponencial de la PCR en tiempo real. Por
ejemplo, en el caso de diluciones dobles con 1, 2,
8 y 16 copias, la media debe ser de cuatro copias
porque se encuentra en el centro de la serie de
dilución. No obstante, la media aritmética es 6,75.
La media geométrica es (1*2*8*16)^(1/4)=4 copias.
Interfaz del usuario para análisis
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