3M Petrifilm Instrucciones De Uso página 11

den Gefrierschrank zurück. Petrifi lm – Platten nach Ablauf des Verfallsdatums nicht mehr verwenden. Der für
die Lagerung der geöffneten Beutel verwendete Gefrierschrank darf keine automatische Abtaufunktion besitzen,
da dies zu einer wiederholten Feuchtigkeitsbelastung der Platten führen kann und diese dadurch beschädigt
werden können.
Verfärbte Platten nicht mehr verwenden. Verfallsdatum und LOT – Nummer sind auf jeder Petrifi lm Packung und
jedem einzelnen Petrifi lm angegeben. Die Lotnummer ist ebenfalls auf den einzelnen Platten angegeben.
Nach Gebrauch können die Petrifi lm AC- Platten mit Mikroorganismen kontaminiert sein, und somit ein
biologisches Gefährdungspotenzial darstellen. Bei ihrer Entsorgung sind die jeweils gültigen Vorschriften und
Gesetze zu beachten.
GEBRAUCHSANLEITUNGEN
Vorbereiten der Probe
1. Geeignete sterile Verdünnungsmittel verwenden:
Butterfi elds Phosphatpuffer 1,2 , 0.1% Peptonwasser
Dikalium-Wasserstoffphosphat 2,3 , Kochsalzlösung (0.85-0.90%), Bisulfi t-freie Letheen-Bouillon oder
destilliertes Wasser.
Keine Puffer benutzen, die Citrat, Bisulfi t oder Thiosulfat enthalten. Sie können das Wachstum der
Keime hemmen. Falls im Standardverfahren Citratpuffer angegeben wird, sollte er mit einem der oben
genannten, auf 40-45°C angewärmten Puffer ersetzt werden.
2. Die Probe mischen oder homogenisieren.
3. Um optimale Wachstumsbedingungen zu erzielen, sollte der pH-Wert der Probe auf 6,6 – 7,2 eingestellt
werden. Bei sauren Produkten, den pH mit 1N NaOH korrigieren. Bei basischen Produkten, den pH mit 1N
HCl korrigieren.
Beimpfen
1. Die Petrifi lm AC- Platte auf eine ebene, fl ache Oberfl äche legen (siehe Abbildung a).
2. Den oberen Film abheben und 1 ml der Probe in die Mitte des unteren Films pipettieren (siehe Abb. b).
3. Legen Sie die obere Folie (nicht rollen) auf die Probe (siehe Abb. c).
4. Setzen Sie den Plastik-Probenverteiler vorsichtig mit der fl achen Seite nach oben auf die Mitte der Platte
(siehe Abb. d). Verteilen Sie die Probe über den komplette Wachstumsbereich bevor sich das Gel verfestigt
hat. Die Probe vor dem Verfestigen des Gels auf dem kompletten Wachstumsbereich verteilen. Den
Probenverteiler nicht über den Film schieben.
5. Den Verteiler abheben und die Platte mindestens 1 Minute, bis zur Verfestigung des Gels, liegenlassen.
1 , Pepton-Salzlösung 2,3 , gepuffertes Peptonwasser 2,3
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Inkubation
Die Platten in horizontaler Lage, mit der durchsichtigen Seite nach oben bebrüten. Es dürfen höchsten 20 Platten
übereinander gestapelt werden. Abhängig von dem lokal eingesetzten Referenzverfahren können verschiedene
Inkubationszeiten und Temperaturen angewendet werden. Einige mögliche Verfahren sind im Abschnitt
"Spezielle Verfahrensanweisungen für validierte Verfahren" aufgelistet.
Petrifi lm AC Platten können mit einem Standardkolonienzähler oder einer anderen vergrößernden
Leuchtlupe gezählt werden.
1. Petrifi lm AC Platten können mit einem Standardkolonienzähler oder unter einer vergrößernden Leuchtlupe
gezählt werden. Alle roten Kolonien ungeachtet Ihrer Größe oder Intensität zählen (siehe Abb. e).
2. Der kreisförmige Wachstumsbereich ist ca. 20 cm
nur eine Schätzung vorgenommen werden. Dazu wird eine repräsentative Anzahl von Quadraten (zwei oder
mehr) ausgezählt und der Durchschnittswert pro Quadrat ermittelt. Zur Bestimmung der Gesamtzahl pro
Platte ist der Durchschnittswert mit 20 zu multiplizieren ( siehe Abbildung f ).
,
3. Hohe Konzentrationen von Kolonien können den gesamten Wachstumsbereich rosa oder rot färben.
Gelgentlich fehlen auf stark bewachsenen Platten sichtbare Kolonien in der Mitte, jedoch können viele
kleine Kolonien am Rand zu sehen sein. Falls einer dieser beiden Fälle auftritt, wird das Ergebnis als „der
Zählung zu zahlreich"(DZZZ) einzustufen. Wenn ein genaues Ergebnis notwendig ist, setzen Sie eine neue
Platte mit einer höheren Verdünnungsstufe an.
4. Einige Keime können den Nährboden verfl üssigen und sich verteilen, wobei das Vorhandensein anderer
Kolonien verdeckt wird. Wenn verfl üssigtes Gel die Zählung beinträchtigt, ist eine Schätzung durch Zählung
der nicht betroffenen Bereiche vorzunehmen.
5. Kolonien können zur weiteren Identifi zierung isoliert werden. Film oben anheben und die Kolonie vom Gel
nehmen (siehe Abb. G Test mittels Standardprozedur.
6. Falls die Platten nicht innerhalb 1 Stunde nach ihrer Entnahme aus dem Inkubator ausgezählt werden
können, können sie zur späteren Auszählung in einem verschließbaren Behälter bei mindestens 15°C (5°F)
für maximal eine Woche eingefroren werden.
Bitte beachten Sie die Interpretationshilfen für weitere Einzelheiten. Falls Sie Fragen zu den Verfahren oder zu
speziellen Anwendungen haben, kontaktieren Sie bitte Ihren offi ziellen 3M Mikrobiologie Ansprechpartner oder
besuchen Sie unsere Website auf www.3m.com/foodsafety.
2 groß. Für Platten die über 300 Kolonien aufweisen, kann
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