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tener un ciclo de descongelamiento automático ya que esto expondría reiteradamente las placas a humedad, lo
que podría dañarlas.
No utilice placas que presenten decoloración. La fecha de vencimiento y el número de lote fi guran en cada
paquete de Placas Petrifi lm. El número de lote también aparece en las placas individuales.
Después de su uso, las Placas Petrifi lm AC pueden contener microorganismos que pueden representar un riesgo
biológico potencial. Cumpla con las normas actuales de la industria al momento de desecharlas.
INSTRUCCIONES DE USO
Preparación de la muestra
1.
Utilice diluyentes estériles adecuados:
1,2
Solución tampón fosfato de Butterfi eld
, 0,1% de agua de peptona
2,3
peptonada tamponada
, solución de di-potasio hidrógeno fosfato
letheen libre de bisulfi to o agua destilada.
No utilice diluyentes que contengan citrato, bisulfi to ó tiosulfato con las Placas Petrifi lm; ya que
pueden inhibir el crecimiento. Si el procedimiento estándar indica solución tampón de citrato, sustitúyala
por una de las soluciones tampón mencionadas anteriormente, calentada a 40-45°C (104-107°F).
2.
Mezcle u homogenice la muestra.
3.
Para un crecimiento y recuperación óptimos de los microorganismos, regule el pH de la suspensión de la
muestra a 6,6 - 7,2. Para los productos ácidos, regule el pH con 1N NaOH. Para los productos alcalinos,
regule el pH con 1N HCl.
Preparación de las placas
1.
Coloque la placa Petrifi lm AC sobre una superfi cie plana y nivelada (ver fi gura a).
2.
Levante la película superior y con la pipeta perpendicular, dispense 1 ml de suspensión de la muestra en el
centro de la película inferior (ver fi gura b).
3.
Deje caer la película superior sobre la muestra (ver fi gura c).
4.
Coloque el difusor plástico con la superfi cie hueca hacia abajo en el centro de la placa (ver fi gura d).
Presione ligeramente el centro del difusor para distribuir la muestra de manera uniforme. Distribuya el
inóculo en toda el área de desarrollo de la Placa Petrifi lm antes de que se forme el gel. No deslice el
difusor a través de la película.
5.
Retire el difusor y deje la placa en reposo durante al menos un minuto para permitir que se forme el gel.
1
2,3
, diluyente de sal peptona
, agua
2,3
, solución salina (0,85-0,90%), caldo
30
Incubación
Incube las placas en posición horizontal con la superfi cie transparente hacia arriba en pilas de no más de 20
placas. Se pueden emplear distintos tiempos y temperaturas de incubación según los métodos de referencia
locales actuales, algunos de los cuales se enumeran en la sección titulada Instrucciones Específi cas para
Métodos Validados.
Interpretación
1.
Las Placas Petrifi lm AC pueden contarse utilizando un contador de colonias estándar u otra lupa iluminada.
Cuente todas las colonias rojas sin tener en cuenta el tamaño o intensidad (ver fi gura e).
2.
El área circular de desarrollo es de aproximadamente 20 cm
placas que contengan más de 300 colonias mediante el recuento de la cantidad de colonias en dos o más
cuadros representativos y la determinación de la cantidad promedio por cuadro. Multiplique la cantidad
promedio por 20 y determine el recuento estimado por placa (ver fi gura f).
3.
Altas concentraciones de colonias en las Placas Petrifi lm AC colorearátoda el área de desarrollo de rojo o
rosa. Ocasionalmente, en placas sobrepobladas, es posible que no haya colonias visibles en el centro pero
sí muchas pequeñas colonias en los bordes. Cuando esto ocurra, registre los resultados como demasiado
numerosas para el recuento (TNTC). Cuando se necesite un recuento real, se deberá utilizar una placa con
una dilución mayor.
4.
Algunos organismos pueden licuar el gel y esto les permite esparcirse y oscurecer la presencia de otras
colonias. Si el gel licuado interfi ere con el recuento, se deberá realizar un recuento estimado mediante el
recuento de las áreas no afectadas.
5.
Cuando sea necesario, las colonias deberán ser aisladas para una mejor identifi cación. Levante la película
superior y tome la colonia del gel (ver fi gura g Ensayo que utiliza procedimientos estándares).
6.
Si las placas no se pueden contar dentro del período de una hora después de retirarlas de la incubadora,
pueden guardarse para una enumeración posterior congelándolas en un contenedor hermético a
temperaturas de menos 15ºC (5ºF) o inferiores por un período máximo de una semana.
Para mayor información, consulte la "Guía de Interpretación" correspondiente a la Placa Petrifi lm. Si tiene alguna
pregunta acerca de aplicaciones o procedimientos específi cos, comuníquese con su representante ofi cial de 3M
Microbiología más cercano o visite nuestro sitio web www.3m.com/foodsafety.
2
. Los cálculos se pueden realizar en las
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