Επώαση
1.
Επωάζετε τα πλακίδια σε οριζόντια θέση, με τη διάφανη πλευρά προς τα επάνω, σε στοιβάδες που δεν περιέχουν περισσότερα
από 20 πλακίδια. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφοροι χρόνοι επώασης και θερμοκρασίες ανάλογα με τις υπάρχουσες
τοπικές μεθόδους αναφοράς, ορισμένες από τις οποίες δίνονται στην παρακάτω ενότητα με τίτλο Επακριβείς Οδηγίες για
Τεκμηριωμένες Μεθόδους. **Βλέπε την εξαίρεση κατά AFNOR, της θερμοκρασίας επώασης για το κατεργασμένο χοιρινό.
2.
Εξετάστε τα πλακίδια για ανάπτυξη κολοβακτηρίων σε οποιαδήποτε χρονική στιγμή κατά την διάρκεια των 24 ± 2 ωρών
επώασης, με το μέσο διάστημα να εξαρτάται από την επιθυμητή πληροφορία και την μέθοδο η οποία ακολουθείται
(περιγράφεται παρακάτω*). Επειδή η ανάπτυξη των κολοβακτηρίων επηρεάζεται από την θερμοκρασία, ο χρόνος εκτός
του επωαστήρα πρέπει να ελαχιστοποιηθεί ώστε να αποφευχθεί η επιμήκυνση του χρόνου ανίχνευσης.
Ερμηνεία και Απαρίθμηση
Για επεξήγηση δείτε την ενότητα" Επακριβείς Οδηγίες για Έγκυρες Μεθόδους"
1.
Έμμεσος φωτισμός από πίσω, μπορεί να ενισχύσει την πρόωρη ανίχνευση των κίτρινων ζωνών οξέος στα πλακίδια Petrifilm
RCC. Οι αποικίες κολοβακτηρίων ενδέχεται να ξεκινήσουν να εμφανίζονται σε 6 ώρες επώασης ως διακριτές κίτρινες ζώνες,
υποδεικνύοντας αποικίες (CFUs) (δείτε την εικόνα e). Συνεχίστε την επώαση των πλακιδίων για την ανίχνευση πρόσθετων
ζωνών οξέος και / ή κόκκινων αποικιών που σχετίζονται με οξύ. Μην καταμετράτε αποικίες στο αφρώδες φράγμα, αφού αυτές
έχουν απομακρυνθεί από την επιλεκτική επιρροή του υποστρώματος. Μην καταμετράτε τεχνητές φυσαλίδες που μπορεί
να υπάρχουν.
Μερικά κολοβακτήρια παράγουν μεγάλες ποσότητες οξέος. Γι΄αυτούς τους οργανισμούς, η συγχώνευση των κίτρινων
όξινων ζωνών μπορεί να συμβεί, σε περίπου 20 αποικίες ανά πλακίδιο. Η κυκλική επιφάνεια ανάπτυξης είναι περίπου 20 cm².
Εκτιμήσεις μπορούν να γίνουν σε πλακίδια που περιέχουν περισσότερες από 50 όξινες ζώνες, μετρώντας τον αριθμό των
όξινων ζωνών σ΄ένα ή περισσότερα αντιπροσωπευτικά τετραγωνίδια και προσδιορίζοντας το μέσο όρο ανά τετραγωνίδιο.
Πολλαπλασιάστε το μέσο όρο επί 20 για να καθορίσετε την συνολικη καταμέτρηση ανά πλακίδιο.
2.
Όπου χρειάζεται, οι αποικίες μπορεί να απομονωθούν για περαιτέρω προσδιορισμό. Ανασηκώστε το ανω φιλμ και επιλέξτε
την αποικία από το gel (δείτε την εικόνα h). Δοκιμή με χρήση κλασσικών διαδικασιών.
3.
Εάν τα πλακίδια δεν μπορούν να καταμετρηθούν εντός 1 ώρας από την αφαίρεση τους απο τον επωαστήρα, μπορούν να
αποθηκευτούν για να καταμετρηθούν αργότερα, καταψύχοντάς τα σε ερμητικά κλειστάκουτιά, σε θερμοκρασίες που είναι
χαμηλότερες από ή ίσες με (μείον) -15°C (5°F)και όχι περισσότερο από μια εβδομάδα.
Για περισσότερες πληροφορίες αναφερθείτε στον κατάλληλο "Οδηγό Επεξήγησης" των Πλακιδίων 3M™ Petrifilm™. Εάν έχετε
ερωτήσεις σχετικά με τις συγκεκριμένες εφαμογές ή διαδικασίες, παρακαλούμε να επικοινωνήστε με τον πλησιέστερο
αντιπρόσωπο της 3M Microbiology ή να επισκεφθείτε την ιστοσελίδα στη διεύθυνση www.3m.com/microbiology.
Ειδικές Οδηγίες για Έγκυρες Μεθόδους
AOAC® Επίσημες Μέθόδοι
σε Τρόφιμα.
Επωάστε τα Πλακίδια Petrifilm RCC έως 24 ώρες ± 2 ώρες στους 35ºC ± 1ºC.
AFNOR Έγκυρη μέθοδος σε συμμόρφωση με ISO 16140
(3M-01/5-03/97 A)
Πεδίο Εγκυρότητας:
Όλα τα τρόφιμα
Χρησιμοποιήστε τις ακόλουθες λεπτομέρειες όταν ακολουθείτε τις παραπάνω οδηγίες για χρήση:
Προετοιμασία δείγματος
Χρησιμοποιήστε μόνο αραιώσεις πιστοποιημένες κατά ISO.
Επώαση
Για κατεργασμένα χοιρινά προϊόντα και θαλασσινά επωάστε τα πλακίδια Petrifilm RCC 14 ώρες ± 30 λεπτά. στους
30ºC ± 1ºC.
Για όλα τα υπόλοιπα τρόφιμα, επωάστε τα πλακίδια Petrifilm RCC 14 ώρες ± 30 λεπτά. στους 35ºC ± 1ºC.
Επεξήγηση
Υπολογίστε τον αριθμό μικροοργανισμών που υπάρχουν στο δείγμα δοκιμής σύμφωνα με το ISO 7218
ανά αραίωση.
Οι εκτιμήσεις είναι εκτός του πεδίου εγκυρότητας του ISO 16140.
AFNOR Έγκυρη Μέθοδος σε συμμόρφωση με ISO 16140 σε σύγκριση με ISO 4832
(3M-01/5-03/97 B)
Πεδίο Εγκυρότητας :
Χρησιμοποιήστε τις ακόλουθες λεπτομέρειες όταν ακολουθείτε τις παραπάνω οδηγίες για χρήση:
Προετοιμασία δείγματος
Χρησιμοποιήστε μόνο τις αραιώσεις απο τη λίστα κατά ISO.
Επώαση
{Για κατεργασμένα χοιρινά προϊόντα και θαλασσινά επωάστε τα πλακίδια Petrifilm RCC 24 ώρες ± 2 ώρες στους
30ºC ± 1ºC.
{Για όλα τα υπόλοιπα τρόφιμα, επωάστε τα πλακίδια Petrifilm RCC 24 ώρες ± 2 ώρες. στους 35ºC ± 1ºC.
2000.15:
Μέθοδος ξηρού επανυδατωμένου φιλμ για Ταχεία Καταμέτρηση των κολοβακτηρίων
SM
Όλα τα τρόφιμα
σε σύγκριση με ISO4832
7
2, 3
2, 3
3
5
για ένα πλακίδιο
6
5