M M A A T T É É R R I I E E L L S S N N É É C C E E S S S S A A I I R R E E S S N N O O N N F F O O U U R R N N I I S S
Réf. 210200 Applicateurs échantillons (1 x 10)
Réf. 210300 Applicateurs échantillons (5 x 10)
Réf. 321200 Antisérum anti-pentavalent (pour les échantillons d'urine et de sérum), 3 ml
Réf. 321300 Antisérum anti-pentavalent (échantillons d'urine et de sérum), 10 x 3 ml
Réf. 210100 Cupules échantillons jetables (100)
Réf. 3100 Solution de REP-prep
P P R R É É L L È È V V E E M M E E N N T T S S D D E E S S É É C C H H A A N N T T I I L L L L O O N N S S
L'utilisation d'urine ou de sérum fraîchement prélevé est fortement recommandée. Bien que les
échantillons de sérum puissent être conservés 4 jours entre 15 et 30 °C, 2 semaines entre 2 et 6 °C ou
6 mois à -20 °C pour les 5 bandes classiques [6], la bande des bêta-2-globulines (complément C3) se
dégrade rapidement en cas de conservation. Il est possible de conserver les échantillons d'urine 72
heures entre 2 et 6 °C ou 2 semaines à -20 °C. Les échantillons d'urine doivent en principe être utilisés
sans concentration ni dilution, à moins que la concentration en protéines ne dépasse 1000 mg/l.
M M É É T T H H O O D D O O L L O O G G I I E E
1. U U r r i i n n e e : Pipeter 35 µl d'échantillon dans les cupules échantillons jetables appropriées. Éviter que
les échantillons ne s'évaporent.
S S é é r r u u m m : Réaliser une dilution 1 + 2 de chaque échantillon en utilisant du diluant IFE. Pipeter 35 µl
d'échantillon dilué dans les cupules échantillons jetables appropriées. Éviter que les échantillons ne
s'évaporent.
2. A A l l l l u u m m e e r r l l e e m m o o d d u u l l e e d d ' ' é é l l e e c c t t r r o o p p h h o o r r è è s s e e p p u u i i s s :
i)
S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Placer avec précaution le porte-échantillon sur le chariot applicateur. S'assurer qu'il
est solidement mis en place.
ii) S S A A S S - - 3 3 : Mettre en place le porte-échantillon avec précaution à l'aide des ergots de guidage de
l'embase. S'assurer qu'il est solidement mis en place.
3. S S o o r r t t i i r r l l e e g g e e l l d d e e s s o o n n e e m m b b a a l l l l a a g g e e p p u u i i s s :
i i ) )
S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Pipeter 400 µl de REP-prep dans le dissipateur thermique. Placer le gel sur le
dissipateur thermique, agarose vers le haut, en respectant les polarités et en veillant à ce qu'il n'y
ait pas de bulles d'air sous le gel.
i i i i ) ) S S A A S S - - 3 3 : Placer le guide d'alignement sur les picots et pipeter 400 µl de REP-prep au centre de la
chambre. Placer le gel dans la chambre, agarose vers le haut, en respectant les polarités et en
veillant à ce qu'il n'y ait pas de bulles d'air sous le gel.
4. Sécher la surface du gel à l'aide d'un buvard C, jeter le buvard.
5. i i ) ) S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Mettre le couvercle sur le gel et les électrodes et faire pression 5 secondes pour
assurer un bon contact.
i i i i ) ) S S A A S S - - 3 3 : Fixer les électrodes sur les plots de sorte qu'elles soient en contact avec les ponts
d'agarose.
6. Mettre en place 2 applicateurs dans l'instrument (utilisateurs du SAS-3 : encoches A et 10).
7. R R é é a a l l i i s s e e r r l l ' ' é é l l e e c c t t r r o o p p h h o o r r è è s s e e D D é é p p i i s s t t a a g g e e P P e e n n t t a a v v a a l l e e n n t t :
i i ) )
S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Électrophorèse : 100 volts, 18 min., 20 °C
Incubation étape 1 : 8 min., 37 °C (incuber)
Incubation étape 2 : 8 min., 40 °C (buvard D)
R R E E M M A A R R Q Q U U E E : Pour les échantillons de sérum, il est nécessaire de réaliser 1 dépôt. Pour les
échantillons d'urine, il est nécessaire de réaliser 10 dépôts.
SAS-1 DÉPISTAGE PENTAVALENT
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Fran ç ais