A A R R T T Í Í C C U U L L O O S S N N E E C C E E S S A A R R I I O O S S N N O O S S U U M M I I N N I I S S T T R R A A D D O O S S
Nº Cat. 210200 Aplicadores de muestras 1 x 10
Nº Cat. 210300 Aplicadores de muestras 5 x 10
N.° Cat. 321200 Antisuero pentavalente (para muestras de orina y suero) 3 ml
N.° Cat. 321300 Antisuero pentavalente (para muestras de orina y suero) 10 x 3 ml
Nº de catálogo 210100 Vasos de recogida de muestras desechables 100
Nº Cat. 3100 REP Prep
R R E E C C O O G G I I D D A A Y Y P P R R E E P P A A R R A A C C I I Ó Ó N N D D E E M M U U E E S S T T R R A A S S
Se ha de elegir como muestra suero u orina recién recogidos. Aunque las muestras de suero pueden
almacenarse 4 días a 15 - 30°C, 2 semanas a 2 - 6°C, ó 6 meses a -20°C para un modelo estándar de
5 bandas6, la banda beta 2-globulina (Complemento C3) se degradará rápidamente al almacenarse. Las
muestras pueden guardarse refrigeradas a 2 - 6°C hasta 72 horas o 2 semanas a -20°C. Inicialmente,
las muestras de orina se utilizarán sin concentración ni dilución, a no ser que se sepa que las proteínas
totales excedan los 1.000 mg/l.
P P R R O O C C E E D D I I M M I I E E N N T T O O P P A A S S O O A A P P A A S S O O
1. O O R R I I N N A A : : Con una pipeta, introducir 35 µl de la muestra en los vasos de recogida de muestras
desechables adecuados. Proteger las muestras de la evaporación.
S S U U E E R R O O : Diluir cada muestra a una dilución 1 + 2, usando diluyente de IFE. Con una pipeta,
introducir 35 µl de la muestra en los vasos de recogida de muestras desechables apropiados.
Proteger las muestras de la evaporación.
2. Encender la unidad de electroforesis y:
i)
U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Colocar cuidadosamente la bandeja con la muestra en la gaveta del
aplicador. Asegurarse de que la bandeja está firmemente introducida en su posición.
ii) U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 3 3 : Colocar cuidadosamente la bandeja con la muestra utilizando los pasadores de
localización de la base de la muestra. Asegurarse de que la bandeja está en una posición segura.
3. Sacar el gel del envase y:
U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : pipetear 400 µL de REP Prep en el disipador térmico. Colocar el gel en
i)
el disipador térmico, con el lado de agarosa hacia arriba, alineando los lados positivo y negativo con
los bordes, teniendo cuidado de evitar las burbujas de aire debajo del gel.
ii) U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 3 3 : colocar la guía de alineación en los pasadores y administrar 400 µL de REP Prep
en el centro de la cámara. Colocar el gel en la cámara con la agarosa hacia arriba, utilizar la guía
para alinear los lados positivo y negativo con los bordes, teniendo cuidado de evitar las burbujas
de aire debajo del gel.
4. Secar la superficie del gel con un secante C y luego desechar el secante.
5. i i ) ) U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Colocar la cubierta sobre el gel y los electrodos, presionar con firmeza
durante 5 segundos para asegurar un buen contacto.
i i i i ) ) U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 3 3 : conectar los electrodos a los bordes, de forma que estén en contacto con
los bloques de gel.
6. Colocar 2 unidades de aplicadores en la posición del instrumento (u u s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 3 3 : : r r a a n n u u r r a a s s A A y y
1 1 0 0 ).
7. Realizar la electroforesis de cribado pentavalente:
i i ) )
U U s s u u a a r r i i o o s s d d e e S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s :
Electroforesis: 100 Voltios, 18 mins, 20°C
Paso de incubación 1: 8 min., 37°C (incubar)
Paso de incubación 2: 8 min., 40°C (secado D)
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CRIBADO PENTAVALENTE SAS-1
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