helena BioSciences SAS-1 Pentavalent Screen Instrucciones De Uso página 22

M M A A T T E E R R I I A A L L I I N N E E C C E E S S S S A A R R I I M M A A N N O O N N I I N N D D O O T T A A Z Z I I O O N N E E
Cod. N. 210200 Lamelle di applicazione dei campioni (1 x 10)
Cod. N. 210300 Lamelle di applicazione dei campioni (5 x 10)
Cod. N. 321200 Antisiero pentavalente (per campioni di urine e siero) 3 ml
Cod. N. 321300 Antisiero pentavalente (per campioni di urine e siero) 10 x 3 ml
Cod. N. 210100 Coppette per campioni monouso (100)
Cod. N. 3100 Preparazione REP
R R A A C C C C O O L L T T A A E E P P R R E E P P A A R R A A Z Z I I O O N N E E D D E E L L C C A A M M P P I I O O N N E E
I campioni ideali sono costituiti dal siero fresco o urine. Mentre i campioni di siero possono essere
conservati fino a 4 giorni ad una temperatura di 15 - 30°C, fino a 2 settimane ad una temperatura di 2
- 6°C o fino a 6 mesi a -20°C, per i tracciati a 5 bande standard 6, la banda della beta-2-globulina
(complemento C3) subisce un rapido degrado. I campioni di urine possono essere conservati in
frigorifero ad una temperatura di 2 - 6°C per un max. di 72 ore o per 2 settimane a -20°C. Inizialmente
i campioni di urine dovrebbero essere utilizzati senza alcuna concentrazione o diluizione, a meno che
non sia già noto che la quantità di proteine totali supera i 1000 mg/l.
P P R R O O C C E E D D U U R R A A
1. U U R R I I N N E E : Pipettare 35 µl di campione nelle coppette per campioni monouso appropriate. Evitare
che i campioni evaporino.
S S I I E E R R O O : Diluire ciascun campione a una diluizione 1 + 2 utilizzando un diluente IFE. Pipettare 35 µl di
campione diluito nelle coppette per campioni monouso appropriate. Evitare che i campioni evaporino.
2. Accendere l'unità di elettroforesi e:
i) P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Collocare con cautela il vassoio per campioni sul cassetto di
applicazione. Assicurarsi che il vassoio sia saldamente inserito in posizione.
ii) P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 3 3 : Collocare con cautela il vassoio per campioni utilizzando i fermi di
posizionamento della base di campioni. Assicurarsi che il vassoio sia posizionato saldamente.
3. Rimuovere il gel dalla confezione e:
P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Distribuire 400 µL di preparazione REP sul dissipatore di calore.
i)
Collocare il gel sul dissipatore di calore con l'agarosio rivolto verso l'alto, allineando i lati positivo e
negativo rispetto ai corrispondenti puntali degli elettrodi, prestando attenzione ad evitare bolle
d'aria sotto il gel.
ii) P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 3 3 : Collocare la guida di allineamento sui fermi e distribuire 400 µL di
preparazione REP al centro della camera. Collocare il gel nella camera con l'agarosio rivolto verso
l'alto; utilizzando la guida, allineare i lati positivo e negativo rispetto ai corrispondenti puntali degli
elettrodi, prestando attenzione ad evitare bolle d'aria sotto il gel.
4. Asciugare la superficie del gel con un blotter C e poi eliminarlo.
5. i i ) ) P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Sistemare il coperchio sul gel e sugli elettrodi e premere con
decisione per 5 secondi per consentire il contatto.
i i i i ) ) P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 3 3 : fissare gli elettrodi all'esterno dei puntali, in modo tale che entrino a
contatto con i blocchi di gel.
6. Collocare 2 gruppi di lamelle di applicazione sullo strumento (per gli utilizzatori di SAS-3: slot A e 10).
7. Elettroforesi dello screen pentavalente:
i i ) ) P P e e r r g g l l i i u u t t i i l l i i z z z z a a t t o o r r i i d d i i S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : Elettroforesi: 100 Volt per 18 minuti a 20°C
N N O O T T A A : Per lo screen del siero è richiesta un'applicazione di campione. Per lo screen delle urine
sono richieste 10 applicazioni di campione.
Fase di incubazione 1: 8 minuti a 37°C (incubare)
Fase di incubazione 2: 8 minuti a 40°C (blot D)
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SCREEN PENTAVALENTE SAS-1
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