Dos Curvas Estándar - Qiagen Rotor-Gene Q MDx Manual Del Usuario

Nota: Los gráficos de amplificación se actualizan en tiempo real a medida que el instrumento
Rotor-Gene Q MDx adquiere datos de forma activa durante una serie. Esta monitorización de los
datos en tiempo real permite al usuario ver los resultados en cuanto las curvas muestran un
crecimiento exponencial. Se pueden extraer conclusiones preliminares y tomar decisiones para la
siguiente serie.
Plantillas de análisis de cuantificación
Las plantillas de análisis de cuantificación permiten al usuario exportar los ajustes de normalización
y de umbral a un único archivo *.qut. Este archivo puede importarse para reaplicar estos ajustes
a otros experimentos. Consulte el apartado 7.1 para obtener más información.
6.6.3 Dos curvas estándar
El análisis de la expresión génica relativa utilizando un gen de normalización, puede llevarse a
cabo con el método de dos curvas estándar.
Dicho método requiere una curva estándar para cada gen. La concentración de cada gen se
cuantifica en función de su curva estándar. A continuación, la expresión del gen de interés se
normaliza con el gen de normalización (por lo general, un gen constitutivo).
Es importante que los estándares y las muestras replicadas se designen correctamente durante la
configuración de las muestras (consulte el apartado "Configuración de muestras"). En concreto, las
muestras correspondientes deben tener el mismo nombre en todos los análisis. En una reacción
multiplexada, en la que las posiciones de los tubos del gen de interés y del gen de normalización
son las mismas, es suficiente con un conjunto de definiciones de muestras. Si se realiza un análisis
relativo con un gen de normalización utilizando un solo canal (es decir, las reacciones se ejecutan
en tubos separados que emplean el mismo fluoróforo), se deben crear 2 páginas de muestras.
En la primera, las posiciones de los tubos deben estar etiquetadas con nombres de muestra para
el gen de interés, mientras que el resto de posiciones debe dejarse sin designar. En la segunda,
deben estar etiquetadas las posiciones utilizadas para el gen de normalización. A continuación,
el software emparejará las muestras de los 2 análisis basándose en sus nombres.
Manual del usuario de Rotor-Gene Q MDx CE 02/2022 101