Introduceți „CAL" drept nume pentru Regiunea G de valori unice pentru Stem-Count sau Flow-Count Fluorospheres și
introduceți valoarea (de exemplu, 1000) în caseta CAL FACTOR (Factor cal.) din ecranul de dialog STATISTICS (Statistici)
al meniului SET-UP SCREEN PROTOCOL (Configurare ecran protocol).
Introducerea CAL Factor (Factor CAL) pentru Stem-Count sau Flow-Count Fluorospheres:
1. În ecranul Acquisition Run (Executare achiziție), selectați Setup Screen >> Protocol (Configurare ecran protocol).
2. Selectați Statistics (Statistici) >> CAL FACTOR (Factor cal.).
3. Introduceți factorul CAL (concentrație testată) de pe fiola Stem-Count sau Flow-Count Fluorospheres.
4. Apăsați pe ENTER (Introducere).
5. Selectați OKAY (OK).
6. Când se afișează promptul, tastați Y pentru yes (da).
Atunci când sunt achiziționate cel puțin 1000 de fluorosfere individuale, valoarea absolută pentru Stem-Trol Control Cells
CD34
este ajustată automat și poate fi preluată direct din rezultatele tipărite pentru statisticile regiunii D.
+
Tabel (mai jos):
Exemplu pentru statistici obținute cu eprubeta TROL 45/34/7-AAD pe software System II, utilizând funcția CAL FACTOR
(factor cal.), unde:
• Concentrația de test pentru Stem-Count Fluorospheres este 1024.
• 5248 este numărul total de fluorosfere acumulate în regiunea CAL pe întregul interval de achiziție.
În acest exemplu, toate numerele sunt ajustate astfel: 1024/5248.
Statistici: Hist.
nenormalizată
1
2
3
4
7
5
1. Înregistrați valorile absolute ajustate (celule/µl) din regiunile D din eprubetele TROL 45/34/7-AAD.
.
Exemplu:
.
Eprubeta TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol Control Cells = 248 celule/µl.
2. Înmulțiți acest număr exact cu factorul de normalizare (N) = 5.
.
OBSERVAŢIE:
.
Este necesară normalizarea valorii absolute de Stem-Trol Control Cells pentru volumele adăugate în cursul testului: stabiliți
valoarea N împărțind volumul din referința de numărare (valori unice Stem-Count Fluorospheres) la volumul de Stem-Trol Control
Cells adăugate la eprubeta de test.
.
. .
Exemplu:
.
100 µl de Stem-Count Fluorospheres sunt adăugate la 20 µl de Stem-Trol Control Cells:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Valoare absolută normalizată Stem-Trol Control Cells = 248 x 5 = 1240 celule/µl.
3. Verificați valoarea absolută pentru Stem-Trol Control Cells obținută comparând-o cu Stem-Trol Control Cells.
Concentrația de test (celule/µl) indicată pe eticheta fiolei. Valoarea absolută de Stem-Trol Control Cells obținută
trebuie să se încadreze în ±15% din concentrația de test pentru Stem-Trol Control Cells. Metoda de colorare și
procesul de lizare sunt acum validate.
.
Exemplu:
.
Concentrație testată pentru Stem-Trol Control Cells = 1380 celule/µl.
.
Interval pentru valori acceptate: 1173–1587 (1380 ± 207) celule/µl
.
B60231–AE
Poartă listă; ID regiune
dezactivat
A
LEUKS
B
CD34 POS
C
CD45 DIM
D
Stem-Trol Control Cells
G
CAL 1024
H
Toate Stem-Count
Fluorospheres
109 of 128
Numere ajustate
(celule/µl)
9798
279
264
248
1024
1046