Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 23

Cellule di controllo Stem-Trol
IM3632
Per uso diagnostico in vitro
USO PREVISTO
Stem-Trol Control Cells è un prodotto di controllo di qualità dosato per analisi di immunofenotipizzazione mediante
reagenti con anticorpi monoclonali CD45 e/o CD34 e citometria a flusso. Tale prodotto fornisce un controllo cellulare
positivo che viene trattato come un campione di sangue quando Stem-Trol Control Cells viene aggiunto in un
campione di sangue intero periferico. Questo consente di verificare le prestazioni dei reagenti e i metodi utilizzati
per la colorazione delle cellule bersaglio (ad es. cellule progenitrici ematopoietiche (HPC) di CD34+), la lisi degli
eritrociti e l'analisi dei campioni con la citometria a flusso.
Se viene eseguita l'analisi manuale, fare riferimento alle istruzioni complete contenute nella confezione di
Stem-Kit Reagents (REF IM3630). In alternativa, se viene utilizzata l'analisi automatica, fare riferimento alla
stemCXP System Guide (Guida al sistema stemCXP) in dotazione al software di sistema stemCXP per istruzioni
complete.
RIEPILOGO
L'analisi di immunofenotipizzazione mediante citometria a flusso comprende l'identificazione e la numerazione
di cellule bersaglio nei campioni biologici. I campioni presi in considerazione vengono colorati con anticorpi
monoclonali e gli eritrociti vengono lisati prima dell'analisi in citometria a flusso. Il controllo cellulare positivo è
necessario per verificare le prestazioni dei reagenti, i metodi di preparazione del campione e le procedure di
colorazione (1). Il controllo cellulare positivo deve simulare una cellula bersaglio rappresentativa in termini di
prestazioni degli anticorpi monoclonali, lisi degli eritrociti e analisi in citometria a flusso.
Stem-Trol Control Cells è una preparazione liquida di cellule derivate KG-1a stabilizzate che presentano
espressione antigenica e proprietà di colorazione CD45 e CD34 che rappresentano quelle rilevate in HPC di
CD34+.
PRINCIPIO
Stem-Trol Control Cells è composto da cellule KG-1a conservate che sono state modificate e stabilizzate per
esprimere epitopi CD34 classe III (2) e antigene comune del leucocita CD45 a densità simili a quelle delle cellule
ematopoietiche normali umane immature. Una miscela di Stem-Trol Control Cells aggiunta nel sangue intero fresco
normale viene dapprima colorata con reagenti di anticorpi monoclonali e con il colorante di vitalità 7-AAD, quindi
lisata per rimuovere gli eritrociti. Per la determinazione diretta delle conte assolute, vengono aggiunti Stem-Count
o Flow-Count Fluorospheres. L'analisi in citometria a flusso della preparazione colorata e lisata determina la conta
assoluta delle cellule bersaglio. I risultati attesi vengono determinati utilizzando Stem-Kit Reagents in citometri
a flusso convalidati e standardizzati FC 500 dotati del software di sistema CXP (versione 2.0) per analizzare i
campioni.
REAGENTI
Stem-Trol Control Cells viene sospeso in una soluzione isotonica, contenente stabilizzanti e BSA. La
concentrazione di cellule analizzate (cellule/µL) deriva da molteplici analisi ripetute utilizzando il metodo di
riferimento. Il valore specifico viene riportato sull'etichetta della fiala.
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
1. I campioni e tutti i materiali che entrano in contatto con essi devono essere maneggiati come se fossero a
rischio di trasmettere infezioni e smaltiti con le dovute precauzioni.
2. Non pipettare con la bocca ed evitare il contatto dei campioni o dei reagenti con la pelle e le mucose.
3. Non utilizzare il reagente dopo la data di scadenza riportata sull'etichetta della fiala.
4. Non congelare i reagenti.
5. Non esporre il reagente a fonti di calore durante la conservazione o l'uso.
6. Evitare l'evaporazione o la perdita di reagente tappando saldamente le fiale dopo l'uso, altrimenti potrebbero
verificarsi risultati errati.
7. Nel corso del tempo Stem-Trol Control Cells tende a depositarsi.
completamente risospese prima dell'uso.
formazione di bolle d'aria. Non pipettare le bolle d'aria per evitare il verificarsi di risultati errati.
8. Utilizzare una pipetta di spostamento positiva calibrata o una pipetta di ripetizione per erogare i campioni e
Stem-Trol Control Cells, altrimenti potrebbero verificarsi risultati errati.
B60231–AE
Evitare l'eccessiva miscelazione per ridurre al minimo la
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Assicurarsi che le cellule siano