Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 45

Stem-Trol kontrolceller
IM3632
Til In Vitro diagnostisk brug
TILSIGTET BRUG
Stem-Trol Control Cells er et analyseret kvalitetskontrolprodukt til analyse af immunofænotypning ved hjælp
CD45- og/eller CD34-monoklonale antistofreagenser og flowcytometer. Det giver en positiv cellekontrol, der
behandles på samme måde som en blodprøve, når Stem-Trol Control Cells tilføres en perifer prøve af helblod.
Det giver mulighed for at verificere reagensets ydeevne og metoderne brugt til farvning af de udvalgte celler
(dvs. CD34+hæmatopoietiske progenitorceller, HPC), lysering af erytrocytter og analyse af prøver med et
flowcytometer.
Se indlægssedlen til Stem-Kit Reagents (Ref. IM3630) for fuldstændige instruktioner, hvis analysen udføres
manuelt. Se stemCXP System Guide (stemCXP-systemvejledningen), som følger med stemCXP-systemsoftwaren
for komplette instruktioner, hvis automatisk analyse anvendes.
RESUMÉ
Immunofænotypiske analyser ved hjælp af flowcytometer omfatter identifikation og nummerering af
udvalgte celler i biologiske præparater.
og erytrocytter lyseres før flowcytometeranalysen.
reagensets ydeevne, prøveforberedelsesmetoderne og farvningsprocedurerne (1). En positiv cellekontrol bør
efterligne en repræsentativ udvalgt celle, hvad angår monoklonalt antistofs adfærd, lysering af erytrocytter og
flowcytometeranalyse.
Stem-Trol Control Cells er et flydende præparat af stabiliserede KG-1a-afledte celler med antigenudtryk samt
CD45- og CD34-farvningsegenskaber, der afspejler dem, der ses på CD34+ HPC.
PRINCIP
Stem-Trol Control Cells er bevarede KG-1a-celler, der er blevet ændret og stabiliseret for at udtrykke CD34
klasse III-epitoper (2) og det almindelige antigen CD45-leukocyt ved tætheder, der ligger tæt på normale umodne
menneskelige hæmatopoietiske celler. En blanding af Stem-Trol Control Cells tilført normalt frisk helblod farves
først med monoklonale antistofreagenser samt 7-AAD Viability Dye og lyseres derefter for at fjerne erytrocytterne.
Der tilsættes Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres for direkte at kunne bestemme de absolutte tællinger.
Flowcytometeranalysen af den farvede og lyserede blanding bestemmer den absolutte tælling af de udvalgte
celler. Forventede resultater bestemmes med Stem-Kit Reagents på validerede og standardiserede FC 500
flowcytometersystemer, der er udstyret med CXP-systemsoftware (Version 2.0) til at analysere prøver.
REAGENSER
Stem-Trol Control Cells sænkes ned i en isotonisk opløsning, der indeholder stabilisatorer og BSA. Den
analyserede cellekoncentration (celler/µL) udledes på baggrund af flere gentagede analyser, der benytter
referencemetoden. Den specifikke værdi er angivet på hætteglassets etiket.
ADVARSLER OG FORHOLDSREGLER
1. Prøveeksemplarer, prøver og al materiale, der kommer i kontakt med dem, bør håndteres, som om de er
kompetente til at overføre infektion, og bortskaffes med de korrekte forholdsregler.
2. Pipettér aldrig med munden, og undgå, at præparater eller reagenser kommer i kontakt med huden eller
slimhinder.
3. Anvend ikke reagenset efter udløbsdatoen på flaskens etikette.
4. Reagenser må ikke fryses.
5. Reagenset må ikke udsættes for varme under opbevaring og brug.
6. Undgå fordampning og udsivning af et reagens ved at sætte hætten på hætteglassene stramt på efter brug.
Ellers kan der forekomme fejlagtige resultater.
7. Stem-Trol Control Cells koloniserer over længere perioder. Sørg for, at cellerne er fuldstændigt opslemmet
inden brug. Undgå overdreven blanding for at minimere dannelsen af luftbobler. Luftbobler må ikke pipetteres,
idet det kan føre til fejlagtige resultater.
8. Brug en kalibreret positiv pipette til overførsel eller gentagelse for at administrere prøver og Stem-Trol Control
Cells, ellers kan der forekomme fejlagtige resultater.
B60231–AE
De interessante præparater farves med monoklonale antistoffer,
Der kræves en positiv cellekontrol for at verificere
45 of 128