Weitere Informationen - Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones

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Statistik: Nicht

normalisierte

Histogramme

1. Die angepassten Absolutzahlen (Zellen/µL) in den Regionen D aus den Probenröhrchen TROL 45/34/7-AAD

aufzeichnen.

Beispiel:

Probenröhrchen TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol Control Cells = 248 Zellen/µL.

2. Diese exakte Zahl mit dem Normalisierungsfaktor (N) = 5 multiplizieren.

ANMERKUNG:

Die Absolutzahl der Stem-Trol Control Cells muss unbedingt hinsichtlich der hinzugefügten Volumina während des Tests

normalisiert werden: N ermitteln, indem Sie das Volumen der Zählreferenz (Singuletten der Stem-Count Fluorospheres)

durch das Volumen der zum Probenröhrchen hinzugefügten Stem-Trol Control Cells teilen.

. .

Beispiel:

100 µL Stem-Count Fluorospheres werden zu 20 µL Stem-Trol Control Cells hinzugefügt:

N = 100 ÷ 20 = 5

Absolutzahl normalisierter Stem-Trol Control Cells = 248 x 5 = 1240 Zellen/µL.

3. Die Absolutzahl der Stem-Trol Control Cells überprüfen, die durch den Vergleich der Zahl mit den Stem-Trol

Control Cells erzielt wird.

Die Assay-Konzentration (Zellen/µL) ist auf dem Fläschchenetikett angegeben. Die erhaltene Absolutzahl der

Stem-Trol Control Cells muss innerhalb einer Abweichung von ±15 % der Assay-Konzentration der Stem-Trol

Control Cells liegen. Die Verfärbungsmethode und der Lysierungsprozess werden jetzt überprüft.

Beispiel:

Assay-Konzentration der Stem-Trol Control Cells = 1380 Zellen/µL.

Bereich annehmbarer Werte: 1173–1587 (1380 ± 207) Zellen/µL

Die normalisierte Absolutzahl = 1240 Zellen/µL liegt innerhalb des Bereichs.

. .

WICHTIG:

Wenn die Absolutzahl der Stem-Trol Control Cells außerhalb des Bereichs annehmbarer Werte fällt, stellen Sie fest,

ob die Pipettierung richtig durchgeführt wurde, insbesondere für die Stem-Count oder Flow-Count Fluorospheres

und die Stem-Trol Control Cells. Die Berichte des Durchflusszytometers und die Qualität des Verfärbungs- und

Lysierungsprozesses in Ihren Probenröhrchen visuell überprüfen. Die Festlegung der Regionsgrenzen überprüfen.

Bei Bedarf die Vorbereitung mit neuen Probenröhrchen wiederholen. Sowohl die neue als auch die vorherige Reihe

Probenröhrchen erfassen und analysieren. Die beiden Ergebnisse vergleichen. Wenn keine Übereinstimmung vorliegt,

wenden Sie sich an Ihren örtlichen Beckman Coulter-Mitarbeiter.

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