Beckman Coulter IM3632 Manual De Instrucciones página 9

Cellules de contrôle Stem-Trol
IM3632
Réservé aux dosages diagnostiques in vitro
UTILISATION
Stem-Trol Control Cells est un produit de contrôle de qualité dosé pour l'analyse de l'immunophénotypage utilisant
des réactifs aux anticorps monoclonaux CD45 et/ou CD34 et la cytométrie en flux. Il fournit un contrôle cellulaire
positif qui est traité de la même manière qu'un échantillon de sang lorsque les Stem-Trol Control Cells sont injectées
dans un échantillon de sang total périphérique. Cela permet de vérifier l'efficacité du réactif et des méthodes
utilisées pour la coloration des cellules cibles (c.-à-d. CD34+ cellules hématopoïétiques progénitrices HPC), la
lyse érythrocytaire et l'analyse des échantillons par cytométrie en flux.
Se référer à la notice des Stem-Kit Reagents (REF IM3630) pour les instructions complètes en cas d'analyse
manuelle. Référez-vous au stemCXP System Guide (Guide du système stemCXP) fourni avec le logiciel système
stemCXP pour consulter les instructions complètes si vous utilisez la méthode d'analyse automatisée.
RÉSUMÉ
L'immunophénotypage par cytométrie en flux permet l'identification et le dénombrement de cellules cibles dans
des échantillons biologiques. Les échantillons intéressants sont colorés avec des anticorps monoclonaux et les
érythrocytes sont lysés avant de procéder à l'analyse cytométrique en flux. Un contrôle cellulaire positif est requis
pour vérifier l'efficacité du réactif, les méthodes de préparation de l'échantillon et les procédures de coloration
(1). Un contrôle cellulaire positif doit imiter une cellule cible représentative en termes d'efficacité de l'anticorps
monoclonal, de lyse érythrocytaire et d'analyse cytométrique en flux.
Stem-Trol Control Cells est une préparation liquide de cellules dérivées de KG-1a stabilisées ayant l'antigène
d'expression et les propriétés colorantes de CD45 et CD34 représentatives de celles trouvées dans CD34+ HPC.
PRINCIPE
Les Stem-Trol Control Cells sont des cellules KG-1a préservées qui ont été modifiées et stabilisées pour exprimer
les épitopes de classe III CD34 (2) et l'antigène leucocytaire commun CD45 à des densités proches de celles des
cellules hématopoïétiques humaines immatures normales. Un mélange de Stem-Trol Control Cells inoculé dans du
sang frais total normal est d'abord coloré par les réactifs d'anticorps monoclonal et le marqueur de viabilité 7-AAD
Viability Dye puis lysé pour retirer les érythrocytes. Les Stem-Count ou Flow-Count Fluorospheres sont ajoutés
pour déterminer directement les valeurs absolues. L'analyse cytométrique en flux de la préparation colorée et
lysée détermine la valeur absolue des cellules cibles. Les résultats attendus sont déterminés à l'aide des Stem-Kit
Reagents sur les systèmes de cytomètres en flux FC 500 validés et standardisés, équipés du logiciel système
CXP (Version 2.0) conçus pour analyser des échantillons.
RÉACTIFS
Les Stem-Trol Control Cells sont en suspension dans une solution isotonique contenant des stabilisants et du BSA.
La concentration cellulaire (cellules/µL) est dérivée des analyses répétées à de multiples reprises en utilisant la
méthode de référence. La valeur spécifique figure sur l'étiquette du flacon.
AVERTISSEMENTS ET PRÉCAUTIONS
1. Les spécimens, les échantillons et tous les objets entrant en contact avec ces derniers doivent être traités
comme étant potentiellement infectieux et doivent être éliminés en respectant les consignes de sécurité
appropriées.
2. Ne jamais pipeter à la bouche et éviter le contact des échantillons ou des réactifs avec la peau et les
muqueuses.
3. Ne pas utiliser le réactif au-delà de la date de péremption figurant sur l'étiquette du flacon.
4. Ne pas congeler les réactifs.
5. Ne pas soumettre les réactifs à la chaleur pendant la conservation ou l'utilisation.
6. éviter l'évaporation ou la fuite de réactifs en rebouchant correctement les flacons après utilisation ou des
résultats erronés peuvent apparaître.
7. Les Stem-Trol Control Cells se déposent lors de périodes prolongées. Assurez-vous de bien remettre les
cellules en suspension avant de les utiliser. Évitez de mélanger de manière excessive afin de minimiser la
formation de bulles d'air. Ne pipetez pas de bulles d'air, au risque d'obtenir des résultats erronés.
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